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miR-302a靶向抑制乳腺癌耐药蛋白表达逆转乳腺癌细胞耐药性

摘要

目的:探讨miR-302a是否可以靶向抑制BCRP的表达逆转乳腺癌耐药。方法:分别通过免疫组化、stemloop-RT PCR检测BCRP及miR-302a在-乳腺癌组织中的表达;采用荧光素酶报告基因分析法验证-miR-302a是否可以靶向抑制BCRP表达;选择乳腺癌耐药细胞MCF-7/MX,通过转染miR-302a mimic增加细胞中miR-302a的表达,采用MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性,流式细胞技术检测细胞内盐酸米托蒽醌的蓄积量,Real time-RT-PCR及Western blot检测BCRP的mRNA与蛋白表达水平.结果:miR-302a与BCRP mRNA 3'UTR区存在结合位点;MCF-7/MX耐药细胞株中miR-302a表达增加后,BCRP蛋白表达水平明显降低(P=0.044);细胞对盐酸米托蒽醌的IC50显著降低(P =0.001),同时,细胞内盐酸米托蒽醌的蓄积量显著增加(P=0.030).结论:miR-302a通过靶向抑制BCRP蛋白表达增加乳腺癌耐药细胞株MCF-7/MX对盐酸米托蒽醌的敏感性.

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