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TLR4信号通路在酒精性肠粘膜屏障损伤中的作用与干预

摘要

目的:探讨TLR4信号通路在酒精对肠粘膜损伤的作用及luteolin的干预作用。方法:培养Caco-2细胞,建立完整肠粘膜屏障模型.采用MTr、Hoechst染色法选择最佳酒精刺激浓度.随后每次实验分为Ctrl组、EtOH组、Lut(luteolin,TBK1抑制剂)组、Lut+EtOH组.采用MTT法检测各组间酒精对细胞的毒性作用;Transwell小板检测各组间荧光素钠的透过率;免疫荧光法检测各组间细胞TLR4受体、TBK1的表达;ELISA法检测各组间TNF-α水平。结果:(1)MTT, Hoechst染色测定10%浓度的酒精为最佳刺激浓度。(2)EtOH组荧光素钠透过率较Ctrl组Lut+EtOH组明显升高,而Ctrl组与Lut组荧光素钠的透过率并无明显差异。(3) EtOH组TLR4, TBKl表达明显高于Ctrl组和Lut组,相比于EtOH组,EtOH+Lut组TLR4受体、TBKl表达减弱。(4) EtOH组TNF-a水平较Ctrl组明显升高,P<0.05,而Lut+EtOH组TNF-a水平较EtOH组有明显的降低,P<0.05。结论:慢性酒精摄人导致了肠上皮TLR4受体表达上调,通过MyD88途径(TRIF途径)非依赖的信号通路TLR4-TBKI,导致TNF-a的释放,进一步导致了肠粘膜的损伤,luteolin可有效阻断TLR4信号通路,可减轻酒精对肠粘膜的损伤。

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