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首页> 中文会议>首届全国方剂组成原理高峰论坛 >大承气汤成分柚皮苷调控胰腺AR42J细胞坏死-凋亡转换分子开关的研究

大承气汤成分柚皮苷调控胰腺AR42J细胞坏死-凋亡转换分子开关的研究

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目的:1.探索大承气汤来源单体成分柚皮苷对雨蛙肽诱导的大鼠胰腺腺泡细胞 AR42J的急性胰腺炎细胞模型坏死-凋亡的调控作用；2.筛选柚皮苷调控AR42J 细胞坏死-凋亡转换的分子开关。rn 方法:选择处于对数生长期的AR42J 细胞，分为正常组、炎症组、治疗组T1、治疗组T1/4、治疗组T1/16。采用雨蛙10-8M 刺激法造成大鼠胰腺腺泡细胞AR42J的急性胰腺炎细胞模型。根据本研究小组前期实验已经测定出的实验性急性胰腺炎模型大鼠血浆中的大承气汤复方来源柚皮苷的血清峰浓度，将其作为1倍给药浓度，再倍比稀释为1/4 倍，1/16 倍，共3个浓度梯度，设4h、8h、16h、24h 共4个时间点。检测在不同浓度梯度下，不同时间点柚皮苷对AR42J 细胞凋亡- 坏死的调控作用。通过ANNEXIN V/PI 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡-坏死比例，Western blot 检测Bax、bcl-2 凋亡蛋白的表达量，ELISA 检测细胞色素C 释放量、Caspase-3 表达量。rn 结果:1. 大承气汤来源柚皮苷能诱导AR42J 细胞凋亡，减少坏死，调控坏死- 凋亡转换。在剂量—效应关系上，凋亡诱导作用随着给药浓度的降低而减弱，1倍血清浓度柚皮苷处理后细胞凋亡-坏死比值升高最明显；在时间-效应上，凋亡诱导作用随着作用时间的延长而减弱。2.柚皮苷能上调BAX/BCL-2 比值，增加细胞色素C的释放量，诱导Caspase-3的产生，并具有明显的量效和时效关系，随着给药浓度的下降和作用时间的延长，其效应减弱。rn 结论:1.大承气汤来源柚皮苷能成剂量依耐性和时间依耐性地调控胰腺腺泡细胞AR42J 坏死-凋亡转换；2. BAX/BCL-2 比值、Caspase-3 可能是其调控坏死- 凋亡转换的分子开关。

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