首页> 中文会议>中国植物病理学会第十届青年学术研讨会 >蜡蚧轮枝菌丝氨酸蛋白酶的分离、鉴定及其基因克隆与表达

蜡蚧轮枝菌丝氨酸蛋白酶的分离、鉴定及其基因克隆与表达

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

蜡蚧轮被菌(Verticillium lecani)是一种重要的昆虫病原真菌,属于丰知菌亚门,寄主范围广泛,能寄生蚧类、蚜虫类、螨类和粉虱,还可寄生鳞翅目的一些害虫及线虫、蓟马等,并且可以通过重寄生的方式来能防治锈病、白粉病、灰霉病和线虫病等植物病害,研究其致病机制对防治植物病虫害及其应用具有重要意义。胞外分泌类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶在蜡蚧轮枝菌寄生害虫及真菌过程中可能起到重要作用。本研究将蜡蚧轮枝菌在SMCS液体培养基中恒温摇培后,培养滤液经硫酸铵分级沉淀、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析、DEAE-SepharoseFast Flow阴离子交换柱层析、CM-Sepharose FastFlowPEI离子柱层析获得了SDS-PAGE谱带单一的蛋白酶,其相对分子质量为38KDa,初步鉴定其为类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶。通过该蛋白酶的理化性质及生物学特性研究表明,其反应最适温度为37℃,最适pH为9.0,Ca2+、M93+等金属离子均对该酶有激活作用,蛋白酶对串珠镰刀菌(Fusariura moniliforme),玉米大斑病菌(Exseroh#um turcicum),柑桔青霉病菌(Penicillium italicum)等有不同程度的抑制作用。在GenBank中查询类枯草杆菌类Prl蛋白的保守序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到其完整开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,命名为Vlprl。此序列长为1134bp,编码378个氨基酸,分子量为38.6KDa，并对VIPr-1蛋白构建系统进化树进行生物信息学分析,发现其为确性蛋白,与球孢白僵菌CDEP蛋白和金龟子绿僵菌中Prl蛋白亲缘关系较近.推测其与昆虫病原真菌侵染昆虫有关.而后构建其原核表达栽体pET-28a-Vlprl,并成功诱导了其在大肠杆菌BL2l(DE3)中的表达,SDS-PAGE检测该蛋白和理论预测的大小一致,表明VlPrl在大肠杆菌中得到了正确表达。

著录项

来源
《中国植物病理学会第十届青年学术研讨会》|2011年|11-18|共8页
会议地点北京
作者
余刚; 刘金亮; 陈宣明; 谢李琴; 张世宏; 潘洪玉;
展开▼
作者单位

中国植物病理学会;

展开▼
会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S476.12;
关键词
蜡蚧轮枝菌; 丝氨酸蛋白酶; 基因克隆; 序列分析; 蛋白特性;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 家蚕肠道产淀粉酶细菌的分离鉴定及其酶基因的克隆与表达 [J] . 杨文静 ,王在贵 ,刘朝良 . 激光生物学报 . 2011,第002期
2. 合浦珠母贝丝氨酸蛋白酶抑制因子基因pfser1克隆与表达 [J] . 陈爽 ,梁健 ,张荣庆 . 广东海洋大学学报 . 2020,第001期
3. 桔小实蝇丝氨酸蛋白酶基因（BdorSer）的克隆与表达分析 [J] . 胡黎明 ,曾玲 ,申建梅 . 西北农林科技大学学报（自然科学版） . 2012,第007期
4. 蜡蚧轮枝菌VL17中杀虫成分分离及鉴定 [J] . 靳强 ,纪明山 ,张丽 . 天然产物研究与开发 . 2013,第B12期
5. 大劣按蚊血淋巴中丝氨酸蛋白酶的分离与鉴定 [J] . 王英 ,张健 ,张锡林 . 中国病原生物学杂志 . 2008,第3期
6. 家蚕耐氟近等基因系SSH文库中碱性丝氨酸蛋白酶基因全长cDNA的克隆与表达特征分析 [C] . 张华光 ,吴萍 ,刘娟 . 江苏省昆虫学会第十三次会员代表大会暨学术研讨会 . 2012
7. 产高温蛋白酶菌株的分离鉴定及蛋白酶基因的克隆与表达 [A] . 尹春筱 . 2018

蜡蚧轮枝菌丝氨酸蛋白酶的分离、鉴定及其基因克隆与表达

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅