欧亚旋覆花总黄酮对D-半乳糖诱导小鼠衰老模型的抗皮肤衰老作用及其机制的研究

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第一部分：探索 D-半乳糖诱导的亚急性小鼠衰老模型的最佳浓度
　　目的：探索构建D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型的最佳浓度。
　　方法：昆明小鼠随机分为5组（每组5只）：空白对照组、不同剂量D-半乳糖组（125mg/kg、250mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg）。空白对照组给予颈背部皮下注射0.3ml生理盐水，其余组均给予同体积不同剂量D-半乳糖每日1次，连续8周。检测细胞周期分布情况；检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性。
　　结果：不同剂量D-半乳糖组小鼠SOD活性明显低于空白对照组，差异有统计学意义（均P＜0.01）;500mg/kg D-半乳糖组SOD活性明显低于125mg/kg D-半乳糖组、250mg/kg D-半乳糖组和1000mg/kg D-半乳糖组（均 P＜0.05）。不同剂量的 D-半乳糖组小鼠阻滞于 G0/G1期的细胞数量明显高于空白对照组，差异有统计学意义（均P＜0.01）;500mg/kg D-半乳糖组阻滞于G0/G1期的细胞数量明显高于125mg/kg D-半乳糖组、250mg/kg D-半乳糖组和1000mg/kg D-半乳糖组（均P＜0.05）。
　　结论：亚急性小鼠衰老模型建立的最佳浓度为500mg/kg D-半乳糖。
　　第二部分：欧亚旋覆花总黄酮对D-半乳糖致小鼠衰老模型的延缓皮肤衰老作用及其机制的研究
　　目的：欧亚旋覆花是中国传统草药，其抗氧化活性与其含有的黄酮类化合物有关。本实验目的是探讨欧亚旋覆花总黄酮（IBFTF）对D-半乳糖诱导的皮肤老化小鼠模型的抗衰老作用及其机制。
　　方法：随机将昆明鼠分成6组（每组10只）：空白对照组、模型组、Vit E组、低、中和高剂量IBFTF组。除空白对照组给予颈背部皮下注射0.3ml生理盐水，其余组均给于同体积D-半乳糖500mg/kg，每日1次，连续8周。造模第3周，低、中和高剂量给药组分别灌服IBFTF0.5ml100 mg/kg、200 mg/kg和400 mg/kg，Vit E组灌服维生素 E100mg/kg,空白对照组和模型组灌服等体积的生理盐水，持续6周。测定抗氧化酶活性如超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）；检测皮肤含水量，羟脯氨酸（Hyp）含量、胶原纤维含量和真皮厚度等皮肤组织学指标；检测细胞周期分布情况；RT-qPCR检测衰老相关目的基因（Sirt1、p16、p21和Cyclin D1）的mRNA表达量；Western blot技术检测衰老相关目的蛋白的表达量。
　　结果：IBFTF组小鼠皮肤组织中SOD、CAT和GSH-Px活力明显高于模型组（均P<0.05），其MDA含量低于模型组（均P<0.05）；IBFTF组小鼠皮肤含水量较模型组明显提高，差异有统计学意义（均P<0.01）；IBFTF组小鼠Hyp含量较模型组明显提高（均P<0.05）；IBFTF组小鼠真皮厚度较模型组明显提高（均P<0.01）；IBFTF组小鼠皮肤组织中胶原纤维含量较模型组明显提高（均P<0.01）；IBFTF组小鼠阻滞于G0/G1期的细胞数量较模型组明显降低,差异有统计学意义（均 P<0.05）；IBFTF组小鼠皮肤组织中Sirt1和 Cyclin D1 mRNA表达量明显高于模型组（均 P<0.05），而 p16, p21 mRNA表达量明显低于模型组（均P<0.01）；同模型组相比，IBFTF组小鼠皮肤组织中Sirt1和 Cyclin D1蛋白表达量明显提高（均 P<0.05），而 p16, p21蛋白表达量明显降低（均P<0.05）。
　　结论：IBFTF是一种天然抗氧化剂，其抗氧化效应可能依赖于Sirt1的调控。

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作者
陈慧;
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作者单位

重庆医科大学;

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授予单位重庆医科大学;
学科外科学
授予学位硕士
导师姓名果磊;
年度 2016
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类医用实验动物学;中药实验药理;
关键词
皮肤衰老; 欧亚旋覆花总黄酮; D-半乳糖; 抗皮肤衰老作用; 动物模型;

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