靶向沉默RIPK4基因对骨肉瘤MG-63细胞生物学特性的研究

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的：研究RIPK4（Receptor-interacting-protein kinase4）基因在骨肉瘤组织及细胞中的表达；通过小干扰RNA沉默骨肉瘤MG-63细胞中RIPK4基因的表达，观察抑制RIPK4基因后对骨肉瘤MG-63细胞生物学行为的影响。
　　方法：使用免疫组织化学方法和实时荧光定量PCR法分别检测骨肉瘤患者原发灶中RIPK4蛋白的表达情况及骨肉瘤细胞中RIPK4mRNA的表达情况；设计具有沉默效应作用的RIPK4siRNA，将其通过载体脂质体转染入骨肉瘤细胞，使MG-63细胞中RIPK4基因的表达水平下调，CCK-8法检测骨肉瘤细胞的增殖水平；流式细胞仪检测细胞凋亡的情况；实时荧光定量 PCR法和蛋白质免疫印迹（Western blot）法分别从mRNA及蛋白的表达水平检测MG-63骨肉瘤细胞中β连环蛋白（β-catenin），细胞周期蛋白（CyclinD1），细胞凋亡及自噬相关因子Bcl-2、LC3及Beclin1的表达。
　　结果：免疫组织化学方法检测显示骨肉瘤患者标本中RIPK4蛋白表达阳性，实时荧光定量PCR法结果显示RIPK4mRNA在骨肉瘤细胞中的表达明显高于正常成骨细胞（P＜0.05）；干扰后，RIPK4siRNA转染组骨肉瘤MG-63细胞中RIPK4 mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组（control siRNA组）及空白对照组（未加任何试剂的MG-63细胞）（p＜0.05）；CCK-8检测骨肉瘤MG-63细胞 RIPK4siRNA转染组较阴性对照组及空白对照组增殖能力明显受到抑制（p＜0.05）；RIPK4siRNA转染组骨肉瘤MG-63细胞中β-catenin mRNA及CyclinD1 mRNA及其蛋白的表达水平下调（p＜0.05）；流式细胞仪检测骨肉瘤细胞转染组较 control siRNA组及空白对照组细胞凋亡率明显增加（p＜0.05）；RIPK4siRNA转染组骨肉瘤MG-63细胞中Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量下降（p＜0.05），Beclin1及LC3 mRNA及其蛋白的表达水平上升（p＜0.05）。
　　结论：①RIPK4蛋白及其 mRNA在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞中异常表达。RIPK4基因可能参与骨肉瘤的发生发展过程。②沉默 RIPK4基因的表达可以抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖，这一作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。③沉默RIPK4基因可以促进骨肉瘤MG-63细胞的凋亡和自噬，且两者之间可能存在一定的联系。

著录项

作者
田夏威;
展开▼
作者单位

兰州大学;

展开▼
授予单位兰州大学;
学科骨科
授予学位硕士
导师姓名王栓科;
年度 2016
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类骨骼肿瘤;肿瘤病理解剖学、组织学;
关键词
骨骼肿瘤; 细胞增殖; 蛋白表达; 病理细胞学;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 沉默SETD8基因表达对骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用 [J] . 张津 ,丁界先 ,安江东 . 临床和实验医学杂志 . 2019,第005期
2. 沉默HOXC10基因促进骨肉瘤MG-63细胞凋亡及其机制 [J] . 张辉 ,程庆 ,周现杰 . 现代肿瘤医学 . 2019,第015期
3. 沉默Bcl2、Bak1基因表达对成骨肉瘤MG-63细胞增殖及成骨能力的影响 [J] . 黄宏兴 ,柴爽 ,黄红 . 山东医药 . 2018,第016期
4. shRNA沉默Survivin基因对人骨肉瘤MG-63细胞成瘤能力的影响 [J] . 段大鹏 ,秦静 ,卫文博 . 现代肿瘤医学 . 2017,第022期
5. 低氧诱导因子-2α基因沉默对骨肉瘤细胞株MG-63生物学行为的影响 [J] . 朱波 ,林珊珊 ,崔春萍 . 天津医药 . 2014,第008期
6. 4’-去甲峨参内酯对HeLa宫颈癌细胞和MG-63骨肉瘤细胞体外增殖抑制作用的观察 [C] . 李永超 ,耿耘 ,马保玉 . 第四届中医药现代化国际科技大会 . 2013
7. SiRNA沉默XIAP基因对骨肉瘤MG-63细胞生物学特性的影响 [A] . 王井伟 . 2015

靶向沉默RIPK4基因对骨肉瘤MG-63细胞生物学特性的研究

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅