二苯乙烯苷对6-羟基多巴胺诱导的多巴胺能神经元损伤的保护作用研究

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目的：观察二苯乙烯苷（ tetrahydroxystilbene glucoside, TSG）对6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）诱导的多巴胺能（dopaminergic, DA）神经元损伤的保护作用，并探讨其可能机制。
　　方法：(1)动物实验：大鼠中脑黒质注射6-OHDA（8μg）制备帕金森病模型，实验随机分为六组：空白组、假手术组、TSG（50 mg/kg）组、模型（6-OHDA，8μg）组、6-OHDA+TSG（10 mg/kg）组、6-OHDA+TSG（50 mg/kg）组。大鼠腹腔连续注射TSG14 d，其中第一次给药30 min后大鼠中脑黑质注射6-OHDA。采用免疫组织化学染色法检测抗酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase, TH）抗体和抗补体受体-3（ OX-42）抗体，分别观察 TSG对 DA神经元损伤的保护作用及对小胶质细胞（microglia, MG）激活的抑制作用。(2)细胞实验：取胎龄14-15 d的SD大鼠胚胎中脑制备神经元—胶质细胞共培养模型，实验随机分为空白组、TSG（80μM）组、6-OHDA（40μM）组、6-OHDA+TSG（20μM）组、6-OHDA+TSG（40μM）组、6-OHDA+TSG（80μM）组。细胞按分组剂量给予TSG处理30 min后再加入6-OHDA，采用免疫细胞化学染色法检测抗TH抗体和抗OX-42抗体，分别观察TSG对DA神经元损伤的保护作用及对MG激活的抑制作用。采用Griess试剂法和ELISA法分别检测细胞上清液中NO、TNF-α和IL-1β含量。采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测 TH和 MG表面特异性蛋白离子钙接头蛋白（ionized calcium-binding adapter molecule-1, Iba-1）以及丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路中ERK1/2和p38磷酸化蛋白的表达水平。
　　结果：(1)动物实验：与空白组相比，模型组DA神经元明显减少，激活的MG增多；经TSG处理后，DA神经元明显增多，激活的MG明显减少。
　　(2)细胞实验：与空白组比较，模型组DA神经元及树突明显减少，MG激活明显增多，细胞培养上清液中NO、TNF-α和IL-1β的含量升高，ERK1/2和p38蛋白磷酸化表达增强；经 TSG处理后，DA神经元明显增加，MG激活被抑制，细胞上清液中NO、TNF-α和IL-1β的含量明显下降，ERK1/2和p38磷酸化蛋白表达下降。
　　结论：TSG对6-OHDA诱导的DA神经元损伤具有保护作用，其作用机制可能与抑制MG介导的神经炎症反应有关。

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作者
林风琴;
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作者单位

遵义医学院;

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授予单位遵义医学院;
学科药理学
授予学位硕士
导师姓名张锋,石京山;
年度 2016
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类震颤麻痹综合征;实验药理学;
关键词
帕金森病; 6-羟基多巴胺; 二苯乙烯苷; 小胶质细胞; 神经炎症;

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