丙戊酸钠对6-羟基多巴胺诱导的多巴胺能神经元凋亡的保护作用

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目的：研究丙戊酸钠(VPA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)大鼠多巴胺能神经元及SH-SY5Y细胞的保护作用。方法：采用脑立体定位黑质内给药法，建立大鼠帕金森病模型，免疫组化法检测VPA对模型大鼠黑质内酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)TH和NF-kB表达的影响。光镜观察VPA对6-OHDA诱导的SH-SY5Y存活的影响，荧光染料Hoechst33342染色观察VPA对SH-SY5Y细胞核形态的影响，Western Blot检测VPA对SH-SY5Y细胞抗凋亡蛋自Bcl-2表达的影响，免疫荧光法检测NF-kB p65在SH-SY5Y细胞中的表达情况。结果：免疫组化结果显示，模型组大鼠黑质内TH阳性细胞的数目明显减少，VPA组与模型组相比，大鼠黑质内TH阳性细胞的数目增多。模型组大鼠黑质有大量的NF-kB p65阳性细胞，并发生核转位；而VPA组大鼠黑质内NF-kB p65染色相对减弱，发生p65核转位的细胞也有所减少。显微镜观察结果显示，6-OHDA处理SH-SY5Y细胞24小时即可引起细胞存活率显著下降，而预先用VPA处理细胞，可提高细胞存活率，细胞突起变长，明显改善6-OHDA引起的细胞形态学变化。Hoechst 33342核染色分析证实，模型组部分细胞的染色质出现典型凋亡样改变，表现为染色质皱缩、浓缩，而VPA组抑制细胞凋亡样改变。Western Blot结果显示，6-OHDA引起SH-SY5Y细胞Bcl-2表达明显减少，而VPA预处理组Bcl-2蛋白含量明显上升。免疫荧光观察显示6-OHDA可诱导NF-kB p65表达增加，并发生核转位，VPA组SH-SY5Y细胞NF-kB p65染色相对减弱，并弥散于细胞内。结论：VPA可通过影响Bcl-2和NF-kB介导的细胞信号机制抑制6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞凋亡，从而对模型大鼠黑质神经元及SH-SY5Y细胞起保护作用。

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作者
夏立平;
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作者单位

苏州大学;

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授予单位苏州大学;
学科药理学
授予学位硕士
导师姓名梁中琴,秦正红;
年度 2007
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类实验药理学;
关键词
丙戊酸钠; 6-羟基多巴胺; 多巴胺能神经元; 细胞凋亡; 实验药理学;

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