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生淀粉糖化酶产生菌的选育与应用

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摘要

根霉2是本实验室保存的一株产生淀粉糖化酶活力较高的菌株,本实验将根霉2产的生淀粉糖化酶应用于生料发酵,研究了37℃木薯生料发酵生成酒精的工艺。通过单因素试验和响应面优化,得到其最优发酵条件为:pH4.6、发酵时间68.9h、加酶量173.00U/g、料液比1:3.5、酵母接种量108/mL、尿素0.2%(w/v),在此条件下发酵,酒精度为9.95%(v/v),与预测值9.90%(v/v)相差不大。另外摇床发酵、添加糖化酶和添加α-淀粉酶对发酵没有明显的提高效果。初步研究了木薯浓醪发酵酒精,采用料液比为1:2.5,发酵时间60h,酒精度达到最大12.89%(v/v)。
   以根霉2为出发菌株,筛选得到突变株UL16,其生淀粉糖化酶活力比出发菌株平均提高28.29%。同时研究了添加2-D-脱氧葡萄糖以筛选抗性突变株,得到突变株K7,酶活平均提高了25.44%。UL16和K7经传代试验,产酶稳定。
   对生淀粉糖化酶进行了硫酸铵初步分离纯化,并研究了生淀粉糖化酶的部分酶学性质。结果表明:最适反应温度为40℃;最适反应pH范围为4.0~4.8;50℃内较稳定,超过此温度酶活急剧下降;pH4.8~9.0范围内较稳定,酶活力都能保持80%以上;金属离子Hg2+、Ni2+、Ag+和Fe3+对酶活有抑制作用,K+、Fe2+和Na+对酶活基本没有影响,Li+、Co2+、Zn2+、Cu2+、Mg2+、Pb2+、Ca2+和Mn2+对酶活有激活作用,其中Mn2+对酶活提高幅度最大,达到88.42%。

著录项

  • 作者

    岑玉秀;

  • 作者单位

    广西大学;

  • 授予单位 广西大学;
  • 学科 发酵工程
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 庞宗文;
  • 年度 2011
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 TQ925.1;
  • 关键词

    生淀粉糖化酶; 响应面法; 选育; 酶学性质;

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