人细胞色素P450氧化还原酶在杆状病毒表达系统中的表达

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文献综述

1.1细胞色素P450氧化还原酶简介

1.1.1细胞色素P450氧化还原酶的发现及其特征

1.1.2细胞色素P450氧化还原酶的分布

1.1.3细胞色素P450氧化还原酶的蛋白结构

1.1.4细胞色素P450氧化还原酶的底物及电子传递

1.2表达系统简介

1.2.1重组蛋白表达系统

1.2.2昆虫杆状病毒表达系统

1.2.3 bac to bac表达系统

1.2.4在昆虫杆状病毒表达系统中影响外源蛋白表达的因素

1.2.5昆虫杆状病毒表达系统的应用及展望

1.3本文研究的目的及意义

材料与方法

2.1实验材料

2.1.1质粒、菌株与细胞系

2.1.2培养基

2.1.3主要试剂和酶类

2.1.4仪器与设备

2.2.实验方法

2.2.1CPR基因的亚克隆

2.2.2重组病毒子Bacmid-cpr的构建

2.2.3昆虫细胞的培养

2.2.4目的蛋白的表达和产物鉴定

结果与分析

3.1重组供体质粒pFastBac 1-cpr的构建

3.1.1目的基因的扩增

3.1.2载体质粒pFastBac 1的双酶切线性化

3.1.3重组转座载体pFastBac 1-cpr的比较大小鉴定、PCR鉴定和双酶切鉴定

3.2重组杆状病毒Bacmid-cpr的构建及鉴定

3.3转移载体杆粒制备

3.4 正常Sf9细胞形态和重组杆状病毒Bacmid-cpr转染后Sf9细胞形态的变化

3.5重组蛋白的Western-blot分析

讨论与展望

参考文献

致谢