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槲皮素对蛋鸡生产性能、体内和体外抗氧化指标的影响

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摘要

1 引言

1.1 槲皮素的概述

1.2 槲皮素的生理功能

1.2.1 抗氧化作用

1.2.2 抗菌作用

1.2.3 抗肿瘤作用

1.2.4 护肝、保肾作用

1.2.5 保护心血管作用

1.2.6 其他

1.3 氧化应激研究进展

1.3.1 氧化应激的原因

1.3.2 氧化应激的危害

1.4 黄酮类化合物的抗氧化作用

1.4.1 直接清除自由基

1.4.2 对生物大分子的保护作用

1.4.3 对抗氧化物酶的作用

1.5 研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 槲皮素体外抗氧化试验

2.2.1 槲皮素对超氧阴离子的清除作用

2.2.2 槲皮素对羟自由基的清除作用

2.2.3 槲皮素对DPPH的清除作用

2.2.4 槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用

2.2.5 槲皮素对红细胞溶血的抑制作用

2.2.6 槲皮素对线粒体膨胀的抑制作用

2.2.7 槲皮素总还原力的测定

2.3 槲皮素体内抗氧化试验

2.3.1 试验设计

2.3.2 试验饲粮

2.3.3 饲养管理

2.3.4 生产性能测定

2.3.5 抗氧化酶的测定

2.4 数据分析

3 结果

3.1 槲皮素对体外抗氧化指标的影响

3.1.1 槲皮素对自由基的清除作用

3.1.2 槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用

3.1.3 槲皮素对红细胞溶血和线粒体膨胀的抑制作用

3.1.4 槲皮素总还原力的测定

3.2 槲皮素对蛋鸡抗氧化指标的影响

3.2.1 槲皮素对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

3.2.2 槲皮素对蛋鸡肝脏抗氧化指标的影响

3.3 槲皮素对蛋鸡生产性能的影响

3.4 拟合曲线模式求测槲皮素的最适添加量

4 讨论

4.1 槲皮素体外抗氧化作用

4.1.1 槲皮素对自由基的清除作用

4.1.2 槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用

4.1.3 槲皮素对红细胞和线粒体的保护作用

4.1.4 槲皮素的总还原力

4.2 槲皮素对蛋鸡抗氧化指标的影响

4.3 槲皮素对蛋鸡生产性能的影响

5 结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

本试验通过体外试验和体内试验对槲皮素的抗氧化作用进行研究。体外试验以维生素C为阳性对照,分别从清除自由基、保护生物大分子及总还原力3方面综合评价槲皮素的体外抗氧化能力;体内试验采用单因素完全随机试验设计,将240只健康、体重和产蛋率相近的37周龄海赛蛋鸡随机分4组,每组6个重复,每个重复10只鸡,对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础饲粮中添加0.02%、0.04%、0.06%槲皮素,研究槲皮素对海赛蛋鸡抗氧化指标和生产性能的影响,同时探讨槲皮素作为饲粮添加剂的最适添加量。
  1.槲皮素对自由基的清除作用
  分别采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法探讨槲皮素对超氧阴离子、羟自由基和DPPH的清除作用,结果发现,槲皮素对O2-清除作用随浓度增加先升高后降低(P<0.01),40mg/L清除率最大(31.93%),但清除作用小于维生素C;槲皮素对·OH清除作用也随浓度的增加先升高再降低(P<0.01),300mg/L清除率最大(61.79%),IC50=218.4mg/L;槲皮素对DPPH清除作用随浓度增加不断升高, IC50=1.47mg/L,清除·OH和DPPH作用均在低浓度时大于维生素C,高浓度时小于维生素C,槲皮素对3种自由基的清除作用为DPPH>·OH>O2-。
  2.槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用
  采用Fe2+诱发卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸体系研究槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用,结果发现,槲皮素对卵黄脂蛋白过氧化的抑制作用随浓度升高不断增大(P<0.01),IC50=11.89mg/L,对脂质过氧化的抑制作用高于维生素C。
  3.槲皮素对红细胞溶血和线粒体肿胀的抑制作用
  分别采用H2O2诱导红细胞溶血,VC-Fe2+诱导线粒体膨胀体系研究槲皮素对红细胞和线粒体的保护作用,结果发现,槲皮素在0.05~1.25 mg/L时对红细胞溶血抑制作用随浓度的升高极显著增加(P<0.01),但浓度过高时(31.25mg/L)抑制作用反而下降,IC50=0.16mg/L,对红细胞溶血抑制作用强于维生素C;槲皮素对线粒体膨胀抑制作用随浓度增加不断增大,根据60min时线粒体的膨胀程度可知,试验组线粒体的完整程度极显著高于模型组(P<0.01)。
  4.槲皮素的总还原力
  采用普鲁士蓝法对槲皮素总还原力进行测定,结果表明,槲皮素总还原力随浓度增加而增大(P<0.01),经计算浓度(x)与还原力(y)的关系为y=-0.0001x2+0.0263x+0.0391,R2=0.9992;根据回归方程可知,槲皮素的总还原力小于维生素C。
  5.槲皮素对蛋鸡抗氧化指标的影响
  体内试验结果表明,与对照组相比,3水平槲皮素组蛋鸡血清总抗氧化能力均极显著升高(P<0.01);0.04%槲皮素组血清丙二醛含量显著降低(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性极显著升高(P<0.01),0.06%槲皮素组血清超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05);3水平槲皮素组肝脏超氧化物歧化酶活性显著升高(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。
  6.槲皮素对蛋鸡生产性能的影响
  同对照组相比,0.02%和0.04%槲皮素组产蛋率分别极显著提高4.96%和8.11%(P<0.01),料蛋比分别显著下降6.55%和11.72%(P<0.05,P<0.01)。
  综上所述,槲皮素在一定浓度范围内具有较强的抗氧化作用,且可以提高37~45周龄蛋鸡的抗氧化能力和生产性能,槲皮素用于提高蛋鸡生产性能的最适添加量为0.04%。

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