首页> 中文学位 >白色念珠菌热休克蛋白90核酸疫苗的构建及其免疫学活性研究
【6h】

白色念珠菌热休克蛋白90核酸疫苗的构建及其免疫学活性研究

代理获取

目录

声明

摘要

中英文缩写

第一章 文献综述

1.核酸疫苗方面的研究进展

1.1 核酸疫苗概述和研究现状

1.2 核酸疫苗的免疫机理

1.3 电转增强核酸疫苗免疫反应的研究

2.白色念珠菌免疫学方面的研究进展

2.1 白色念珠茵感染概述

2.2 白色念珠菌Hsp90的相关介绍

2.3 白色念珠菌疫苗的研究进展和展望

3.本研究目的及意义

第二章 实验材料与方法

1.实验材料和仪器

1.1 质粒和菌株

1.2 主要药品与试剂

1.3 主要实验仪器

2.实验方法

2.1 基本实验操作方法

2.2 pcDNA3.1/HSP90的构建

2.3 R-Hsp90的诱导表达、纯化

2.4 pcDNA3.1/Hsp90免疫学活性研究

第三章 实验结果与分析

1.pcDNA3.1/Hsp90的构建结果

1.1 目的基因的扩增结果

1.2 pcDNA3.1/Hsp90的酶切鉴定结果

1.3 pcDNA3.1/Hsp90插入基因片段的序列测定

2.R-Hsp90的表达、纯化

2.1 R-Hsp90在大肠杆菌中的表达情况

2.2 R-Hsp90的纯化情况

3.pcDNA3.1/Hsp90免疫学活性分析

3.1 电转条件的优化

3.2 Western blot检测免疫小鼠抗血清中抗R-Hsp90抗体的特异性

3.3 ELISA检测免疫小鼠抗血清中抗R-Hsp90特异性抗体IgG含量

第四章 讨论

1.目的基因的选择

2.载体的选择

3.小鼠免疫方式中电转条件的选择

结论

参考文献

附图

致谢

展开▼

摘要

核酸疫苗(DNA vaccine)是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因序列插入到质粒载体中,该重组质粒就称为核酸疫苗。核酸疫苗又称为基因疫苗。核酸疫苗是继病原体疫苗、亚单位疫苗之后出现的第三代疫苗,与传统的疫苗相比具有多价、高效、价廉、安全等许多优势。
  白色念珠菌(Candida albicans)是一种寄生在动物和人的口腔和胃肠道的条件致病菌,它可以在机体免疫力下降和正常菌群失调时作为机会病原体,引起机体的浅层感染(也称粘膜性感染)和系统性感染(也称深层感染或全身性感染)。系统性白色念珠菌感染危害巨大,据科学家统计,在使用了抗真菌药物后,该病的死亡率仍高达70%以上。随着发病率和致死率的不断增加,越来越多的科学工作者投入到白色念珠菌免疫学机制的研究中。
  英国曼彻斯特医学院的Matthews等人长期从事白色念珠菌免疫学方面的研究,他们发现在系统性白色念珠菌感染中热休克蛋白90(Hsp90)起着主要的病理学作用。并确定了Hsp90的抗原表位图谱,发现了2个能够与病人血清起反应的常见表位,即表位C和H,表位C是一种保守表位,能够与所有病人的血清起反应;表位H是白色念珠菌所特有的一种表位,它能够被大约50%的病人血清识别。
  本实验选择了Hsp90全基因序列中含有编码C、H表位的一段DNA序列,构建了核酸疫苗pcDNA3.1/Hsp90。通过肌肉注射后电转(electroporation)的方式免疫小鼠,Western blot结果表明:经热休克蛋白90重组质粒(pcDNA3.1/Hsp90)免疫小鼠抗血清中产生了抗热休克蛋白90重组蛋白(R-Hsp90)特异性抗体; ELISA结果表明:经pcDNA3.1/Hsp90组免疫后小鼠抗血清中抗R-Hsp90特异性抗体IgG的抗体含量,与pcDNA3.1组和PBS组比较得到了显著提高(P<0.01)。本实验为进一步研究白色念珠菌核酸疫苗奠定了坚实基础。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
代理获取

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号