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染色体改构复合物(BAF)与转录因子(NF1/CTF)和RNA聚合酶Ⅱ在基因转录活动中的联系

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第一章前言

一、染色体结构与基因的转录活动

二、染色体改构复合物SWI/SNF

1、SWI/SNF复合物的发现及种类

2、依赖ATPase的染色体改构复合物(SWI/SNF)对基因转录的调节作用

三、转录因子NF1/CTF

1、NF1/CTF的结构

2、NF1/CTF对转录的调节作用

四、染色体改构复合物BAF和转录因子NF1/CTF与RNA聚合酶Ⅱ介导的基因转录活动

五、本论文研究的内容和意义

第二章材料与方法

一、实验材料

1、细胞

2、抗本

3、主要试剂

4、主要仪器和设备

二、实验方法

1、静止小鼠脾T淋巴细胞分离

2、HeLa细胞的免疫胶体金透射电镜观察

3、小鼠脾T淋巴细胞核的分离和核蛋白的免疫印迹分析

4、免疫荧光双标记

5、免疫沉淀分析蛋白质

6、酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)

第三章实验结果

一、在哺乳动物细胞中,染色体改构复合物BAF和转录因子NF1/CTF的表达与基因的活化相关

二、染色体改构复合物BAF与转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ在细胞核中相互作用

1、染色体改构复合物BAF与转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ紧密结合

2、染色体改构复合物BAF与转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ的免疫荧光共定位分析

3、染色体改构复合物BAF与转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ的免疫电镜双标记分析

三、染色体改构复合物BAF和转录因子NF1/CTF同RNA聚合酶Ⅱ小亚基RBB6、RPB8的相互作用

四、肌动蛋白作为染色体改构复合物的组成成分可能与基因的转录活动相联系

第四章讨论

一、BAF复合物和转录因子NF1/CTF的表达与细胞的活化

二、BAF复合物与RNA聚合酶Ⅱ

三、BAF复合物与转录因子NF1/CTF

四、转录因子NF1/CTF与RNA聚合酶Ⅱ

五、肌动蛋白与BAF复合物及转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ

六、转录起始复合物的形成

结 论

本论文的主要的创新点

参考文献

致 谢

博士期间公开发表的论著

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摘要

哺乳动物SWI/SNF(BAF)复合物和转录因子(NFI/CTF)都是转录活动的重要调控因子,许多实验证实,它们共同参与了基因转录调控活动.BAF复合物与转录因子NF1/CTF是否一同参加了由RNA聚合酶Ⅱ介导的基因转录起始复合物的形成,目前还没有比较一致的认识,已有的模型仍缺乏实验支持.该文以Jurkat细胞、HeLa细胞和小鼠脾T淋巴细胞为研究材料,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫共沉淀、免疫荧光共定位和免疫电镜双标记等实验,观察和分析了BAF复合物与转录因子NF1/CTF和RNA聚合酶Ⅱ在基因转录活动中的相互联系.

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