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重症肌无力特异性免疫吸附剂的制备及对患者血清的动态吸附试验

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目录

第一章 前 言

第二章 实验材料

2.1载体制备、活化所需试剂与材料

2.2选择、连接配基所需试剂

2.3人工合成人AChR上α亚单位MIR片段的10氨基酸多肽

2.4酶联免疫吸附法(ELISA)测定AChR抗体所需试剂及材料

2.5实验仪器

第三章 实验方法

3.1 吸附剂的制备

3.2体外动态吸附[10]

3.3 ELISA法检测血清中AChR滴度

第四章 实验结果

4.1体外动态吸附实验结果

第五章 讨论

结论

参考文献

致谢

附:综述:重症肌无力的治疗现状

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摘要

目的:制备一种对重症肌无力(MG)致病性抗乙酰胆碱受体(AChR)抗体具有特异性吸附作用的免疫吸附剂。通过与MG患者血清作动态吸附试验研究所制备的特异性免疫吸附剂对致病性AChR抗体的吸附作用。
  方法:利用悬浮再生法合成纤维素含量为10%的球型纤维素,从中筛选出20~40目大小的球形纤维素作为载体,以环氧氯丙烷对其进行活化,环氧基含量可达92μmol/克。将人工合成的人AChRα亚单位67~76位10个氨基酸多肽作为配基,固定于环氧氯丙烷活化后的球型纤维素上制备出重症肌无力特异性免疫吸附剂,所制备的免疫吸附剂与10倍体积的AChR抗体阳性的病人血清在37℃条件下以2ml/分钟的速度循环4小时,应用酶联免疫吸附法检测反应前后抗体吸光度计算吸附率。
  结果:以球形纤维素为载体,人工合成的人AChRα亚单位67~76位10个氨基酸多肽作为配基所制备的免疫吸附剂,在血清动态吸附试验中对血清中致病性AChR抗体的吸附率随吸附时间延长而上升,并在吸附开始后2个小时达到最高峰,吸附率可达26.59%。
  结论:以球型纤维素为载体,以人工合成的人AChRα亚单位67~76位10个氨基酸多肽为配基的免疫吸附剂,对致病性AChR抗体吸附率较好,是一种治疗MG较理想的免疫吸附剂。

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