高产ε-聚赖氨酸白色链霉菌的原生质体诱变选育及发酵研究

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声明

1前 言

1.1生物防腐剂

1.1.1乳酸链球菌素(Nisin)

1.1.2纳他霉素(Natamycin)

1.1.3ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)

1.2ε-聚赖氨酸(ε-PL)研究进展

1.2.1ε-聚赖氨酸的理化性质

1.2.2ε-聚赖氨酸的抑菌性质

1.2.3菌种分离及选育

1.2.4ε-聚赖氨酸发酵生产

1.2.5ε-聚赖氨酸的应用

1.3本课题的研究意义及主要研究内容

2材料与方法

2.1材料

2.1.1菌种

2.1.2试剂

2.1.3培养基

2.1.4相关溶液

2.1.5试验设备

2.2方法

2.2.1培养方法

2.2.2诱变育种及筛选方法

2.2.3分析方法

3结果与讨论

3.1ε-聚赖氨酸快速检测方法的建立

3.1.1ε-聚赖氨酸检测方法的初探讨

3.1.2铋-硫脲复合物的稳定性

3.1.3发酵液中pH值对测定结果的影响

3.1.4ε-聚赖氨酸的标准曲线

3.1.5样品测定及精密度试验

3.1.6回收率试验

3.1.7 Dragendoff's沉淀法与Itzhaki法测定结果比较

3.1.8在产ε-聚赖氨酸菌种筛选中的应用

3.2白色链霉菌UN2-71原生质体的制备与再生

3.2.1出发菌株白色链霉菌UN2-71的生长曲线

3.2.2溶菌酶浓度的选择

3.2.3溶菌酶作用时间的选择

3.3白色链霉菌UN2-71原生质体诱变选育

3.3.1 DES诱变剂量的确定

3.3.2 DES致死率曲线

3.3.3ε-聚赖氨酸高产菌种的初筛

3.3.4摇瓶复筛

3.3.5高产菌种遗传稳定性的考察

3.3.6突变株D3-32与出发菌株UN2-71的特征比较

3.4突变株D3-32发酵罐分批发酵

3.4.1出发菌株UN2-71发酵特性

3.4.2突变菌株D3-32发酵特性

3.4.3调控pH对S.albulus D3-32产ε-聚赖氨酸的影响

3.4.4S.albulus D3-32补料分批发酵

3.5 S.albulus D3-32发酵液中抗菌活性的测定

主要结论

展望

致谢

参考文献

附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文