声明
摘要
符号与缩略语说明
前言
第一章 文献综述
一 纤维素酶基因的研究进展
1 纤维素酶的来源
2 纤维素酶结构研究现状
3 纤维素结合域(CBD)的应用
4 纤维素酶基因改造的研究现状
二 毕赤酵母表达研究进展
1 毕赤酵母表达系统
2 影响外源基因在毕赤酵母中表达的因素
三 纤维素酶的应用及发展
参考文献
第二章 cel5G基因与纤维素结合域基因的融合表达
1 材料与方法
1．1 菌株与质粒
1．2 培养基
1．3 试剂与主要仪器
1．4 常用溶液
1．5 重组基因的扩增，纯化及TA克隆
1．6 表达载体pET29a-cel5G-CBD的构建
1．6 重组基因的表达
1．7 重组基因的活性验证
2 结果与分析
2．1 CBD基因的合成
2．2 CBD基因的扩增
2．3 重组基因的构建
2．4 表达载体的构建
2．5 表达载体酶活的测定
2．6 与微晶纤维素结合力的测定
3 讨论
3．1 重组基因在大肠杆菌中的表达
3．2 融合表达后酶的活性
3．3 重组酶对微晶纤维素的降解
参考文献
第三章 β-1,4-葡聚糖内切酶Cel5G在毕赤酵母中表达及酶学性质研究
1 材料与方法
1．1 菌种与质粒
1．2 培养基与常用溶液
1．3 工具酶与试剂
1．4 实验方法
1．5 转化子鉴定
1．6 酶学性质的研究
2 结果与分析
2．1 重组质粒pEFaA-cel5G的构建策略
2．2 重组纤维素酶Cel5G毕赤酵母菌株的构建
2．3 酵母转化子的鉴定
2．4 酵母表达酶酶学性质
3 讨论
参考文献
全文总结
本文创新之处
附录一：文中所用试剂配方
附录二：文中所合成的基因序列
致谢
