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禽网状内皮组织增生病病毒诱导宿主天然免疫反应及感染法氏囊转录组学的研究

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论文说明

摘要

符号说明

1.禽网状内皮组织增生病

1.1禽网状内皮组织增生病病毒形态结构及理化特性

1.2禽网状内皮组织增生病病毒的基因结构与功能

1.3 REV临床症状和病理变化

1.4 REV免疫抑制机理

1.5流行病学

1.6诊断方法

1.7 REV的防治

2.转录组学技术在动物性病毒研究中的应用

3.先天免疫抗病毒的研究进展

4.本研究的目的与意义

研究内容一 REV感染对外周血淋巴细胞中天然免疫相关基因转录的影响

1材料与方法

1.1细胞和病毒

1.2主要试剂

1.3主要仪器

1.4主要试剂配制

1.5鸡外周血淋巴细胞的分离

1.6病毒感染

1.7引物序列

1.7 Real-time PCR检测

2.实验结果

2.1 REV感染鸡外周血淋巴细胞中病毒复制情况

2.2荧光定量PCR检测天然免疫受体相关分子表达情况

2.3荧光定量PCR检测天然免疫信号通路相关分子表达情况

2.4荧光定量PCR检测炎症免疫相关细胞因子表达情况

2.5荧光定量PCR检测抗病毒相关分子表达情况

3.讨论

研究内容二 REV对SPF鸡主要免疫器官中免疫相关细胞因子表达的影响

1材料与方法

1.1实验动物与病毒

1.2主要试剂

1.3主要仪器

1.4实验动物分组和病毒接种

1.5脏器的采集及处理

1.6 RNA的提取

1.7 RNA的浓度测定及反转录

1.8引物序列

1.9 Real-time PCR检测

2结果

2.1荧光定量PCR检测病毒在不同脏器中的复制情况

2.2荧光定量PCR检测REV感染PBL免疫相关分子的表达情况

2.3荧光定量PCR检测REV感染胸腺免疫相关分子的表达情况

2.4荧光定量PCR检测脾脏中免疫相关分子的表达情况

2.5荧光定量PCR检测REV感染盲肠扁桃体中免疫相关分子的表达情况

2.6荧光定量PCR检测REV感染法氏囊免疫相关分子的表达情况

3.讨论

研究内容三 REV感染SPF鸡法氏囊的转录组学研究

1材料与方法

1.1实验动物与病毒

1.2主要试剂

1.3主要仪器

1.4病毒感染法氏囊组织的收集

1.5生物信息学分析

1.6引物序列

1.7荧光定量PCR检测

2结果

2.1测序数据质量评估

2.2差异表达基因的GO富集分析

2.3 REV感染引起的宿主应答反应

3讨论

3.1宿主防卫功能相关的差异表达基因

3.2细胞因子相关的差异表达基因

3.3宿主肿瘤相关的差异表达基因

3.4信号通路分析

研究内容四 Toll样受体配体对REV复制的影响

1材料与方法

1.1细胞和病毒

1.2主要试剂

1.3主要实验仪器

1.4主要试剂的配制

1.5 CEF的制备

1.6 REV感染CEF前配体刺激

1.7 REV感染CEF中配体刺激

1.8 REV感染CEF后配体刺激

1.9引物序列

1.10间接免疫荧光检测配体处理CEF对REV复制的影响

1.11荧光定量PCR检测

2结果

2.1 Toll样受体配体预刺激细胞对REV及抗病毒相关分子的影响

2.2 Toll样受体配体与REV同时刺激细胞对病毒及抗病毒相关分子的影响

2.3 REV感染后Toll样受体配体刺激细胞对REV复制及抗病毒分子的影响

3讨论

全文总结

参考文献

致谢

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