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【6h】

丹参酮IIA通过Rho/Rho激酶系统对人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

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摘要

目的:
　　观察波动性高糖在体外诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的损伤作用;研究丹参酮ⅡA通过Rho/Rho激酶系统对损伤的血管内皮细胞的保护作用，并探讨其机制。
　　方法:
　　1.波动性高糖对血管内皮细胞的损伤作用
　　1.1实验分组:
　　A.正常对照组(恒定加入5.5 mmol/LGlu);
　　B.5.5 mmol/L/10 mmol/L Glu组(每24h轮换加入5.5 mmol/L Glu或10mmol/L Glu);
　　C.5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu组(每24h轮换加入5.5 mmol/L Glu或20mmol/L Glu);
　　D.5.5 mmol/L/30 mmol/L Glu组(每24h轮换加入5.5 mmol/L或30 mmol/LGlu)。
　　1.2实验方法:各组分别与HUVEC培养72 h，显微镜下观察各组细胞形态变化，测定各组细胞的细胞活力(MTT)，测定各组细胞上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)的含量。
　　2.丹参酮ⅡA通过Rho/Rho激酶系统对波动性高糖损伤的HUVEC的保护作用
　　2.1实验分组:波动性高糖损伤对照组（5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波动性高糖组）;丹参酮ⅡA保护组(在波动性高糖损伤组基础上加入浓度分别为10，30，50ug/mL的丹参酮ⅡA);维生素C阳性对照组（在波动性高糖损伤组基础上加入浓度为100 mg/L）。
　　2.2实验方法:各组HUVEC培养48 h，测定各组细胞上清液中MDA、SOD、NO、NOS含量及细胞中ROCK1 mRNA含量。
　　结果:
　　1.正常对照组与波动性高浓度葡萄糖组HUVECs形态有明显差异。培养液中SOD、NO的含量在波动性高浓度葡萄糖组较对照组降低（P＜0.05，P＜0.01），MDA的含量在波动性高浓度葡萄糖组较对照组升高(P＜0.05，P＜0.01)。
　　2.丹参酮ⅡA(10，30，50 ug/mL)药物保护组细胞培养液中SOD、NO、NOS的量均较5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波动性高糖组增高(P＜0.05，P＜0.01)，MDA的量均较5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波动性高糖组降低(P＜0.05，P＜0.01)，其中以50 ug/mL丹参酮ⅡA组更为明显(P＜0.01);ROCKⅠ mRNA含量在波动性高糖损伤组较正常对照组升高(P＜0.05)，丹参酮ⅡA保护组较损伤组降低(P＜0.05，P＜0.01)。
　　结论::
　　1.波动性高糖对血管内皮细胞具有损伤作用。
　　2.波动性高糖体外诱导人血管内皮细胞损伤的机制可能与波动性高糖环境下氧化应激水平升高，炎症反应加重有关。
　　3.丹参酮ⅡA对波动性高糖体外诱导的HUVEC损伤有保护作用。
　　4.丹参酮ⅡA可能通过Rho/Rho激酶系统对人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤起到保护作用。

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