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引 言
1文献综述
1.1 IgY的研究进展
1.1.1 IgY的结构及功能
1.1.2 IgY的性质
1.1.3 IgY分离纯化方法的研究进展
1.1.4 IgY应用的研究进展
1.1.5保护IgY口服活性的研究进展
1.2壳聚糖-海藻酸钠生物微囊的研究进展
1.2.1微囊化技术概况
1.2.2壳聚糖与海藻酸钠
1.2.3壳聚糖和海藻酸钠反应微囊化原理
1.2.4壳聚糖-海藻酸钠微囊的制备方法
1.2.5壳聚糖-海藻酸钠生物微囊的应用研究进展
1.3本论文的研究意义和主要工作
参考文献
2抗产肠毒素大肠杆菌K88的特异性IgY的制备
2.1前言
2.2实验材料及设备
2.2.1实验动物
2.2.2菌种
2.2.3试剂
2.2.4仪器
2.2.5溶液配置
2.3实验方法
2.3.1细菌培养及菌毛的制备、纯化
2.3.2免疫原的制备
2.3.3蛋鸡的免疫
2.3.4鸡蛋的收集及水溶性组分的提取
2.3.5间接ELISA法检测特异性IgY抗体效价的建立
2.3.6蛋白质含量的测定
2.3.7菌毛蛋白纯度的测定
2.4结果与分析
2.4.1菌毛的纯化
2.4.2棋盘滴定法确定抗原包被量
2.4.3不同浓度的菌毛蛋白对蛋鸡的免疫效果
2.4.4不同浓度的全菌对蛋鸡的免疫效果
2.4.5茵毛蛋白与全菌对蛋鸡免疫效果的比较
2.5讨论
2.6小结
参考文献
3 IgY的分离、纯化及稳定性研究
3.1前言
3.2实验材料及设备
3.2.1实验材料
3.2.2试剂
3.2.3仪器
3.2.4溶液配置
3.3实验方法
3.3.1 IgY分离、纯化的工艺路线
3.3.2 IgY含量测定
3.3.3 IgY回收率及纯度测定
3.3.4 IgY活性检测
3.3.5热处理
3.3.6不同酸度处理
3.3.7胃蛋白酶处理
3.3.8胰蛋白酶处理
3.3.9 IgY的冷冻干燥稳定性
3.3.10 IgY的贮藏稳定性
3.4结果与分析
3.4.1 (NH4)2S04盐析条件的优化
3.4.2 Na2SO4盐析条件的优化
3.4.3 IgY的分离及纯化
3.4.5 IgY的热稳定性
3.4.6 IgY的酸稳定性
3.4.7 IgY对胃蛋白酶的稳定性
3.4.8 IgY对胰蛋白酶的稳定性
3.4.9 IgY的冷冻干燥稳定性
3.4.10 IgY的贮藏稳定性
3.5讨论
3.6小结
参考文献
4 IgY微囊的制备及性能表征
4.1前言
4.2实验材料及设备
4.2.1实验材料
4.2.2试剂
4.2.3仪器
4.2.4溶液配置
4.3实验方法
4.3.1空白壳聚糖-海藻酸钠微囊的制备、粒径分布及形态学研究
4.3.2 IgY微囊的制备、粒径分布及形态学研究
4.3.3 IgY微囊性能检测
4.3.4数据处理
4.4结果与分析
4.4.1物理条件对空白微囊粒径及形态学的影响
4.4.2成囊溶液的pH对微囊性能的影响
4.4.3壳聚糖浓度对微囊性能的影响
4.4.4 CaCl2浓度对微囊性能的影响
4.4.5海藻酸钠浓度对微囊性能的影响
4.4.6药载比对微囊性能的影响
4.4.7微囊体外释放形貌观察
4.5讨论
4.5.1成囊溶液的pH对微囊性能的影响
4.5.2壳聚糖浓度对微囊性能的影响
4.5.3 CaCl2浓度对微囊性能的影响
4.5.4海藻酸钠浓度对微囊性能的影响
4.5.5药载比对微囊性能的影响
4.6 小结
参考文献
5 IgY微囊对攻毒仔猪的治疗试验
5.1前言
5.2实验材料及设备
5.2.1试验动物
5.2.2菌种
5.2.3实验材料
5.2.4试剂
5.2.5仪器
5.2.6溶液配置
5.3实验方法
5.3.1细菌培养
5.3.2 IgY微囊的制备
5.3.3仔猪攻毒及治疗试验
5.3.4效果判定
5.3.5 ETEC K88浓度检测
5.4结果与分析
5.4.1临床观察
5.4.2直肠拭子中ETEC K88浓度变化
5.4.3胃及小肠pH值
5.5讨论
5.6小结
参考文献
6结论与展望
6.1结论
6.2展望
创新点摘要
附录A 成囊系统装置图
攻读博士学位期间发表学术论文情况
致 谢
大连理工大学;