上海市食品中单核细胞增生李斯特菌污染特征与菌膜形成能力的分析

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单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一种常见的食源性致病菌，在自然界中普遍存在，可通过食品感染人类，致死率高达20％～30%。在食品生产环境中，该菌能形成菌膜以抵御消毒剂的伤害，从而增加食品在加工过程中被污染的几率，带来食品安全危害。
　　本研究从农贸市场、超市和奶场采集食品样品，采用国家标准GB4789.30-2010并结合PCR方法，对648份食品进行检测，发现40份样品具有阳性结果，并分离得到86株单增李斯特分离株，总检出率6.17%。各类食品检出率由高到低依次为：生肉（15.96%）、速冻食品（9.90%）、熟肉（7.27%）、水产品（4.17%）、生乳（4.16%）、蔬菜（2.02%），乳制品和豆制品中没有检出该菌。该结果表明上海市单核细胞增生李斯特菌污染食品的广泛性，其中生肉、速冻食品污染率较高，熟肉作为即食食品也存在该菌的污染，存在食品安全风险。
　　对分离得到的86株单核细胞增生李斯特菌进行分型研究。采用血清凝集和多重 PCR的方法，将86株分离株分成四个血清型：1/2a（n=62），1/2b（n=17）、1/2c（n=4）和3c（n=3）。致病性较强的血清型1/2a、1/2b占91.9%，说明上海市食品中单核细胞增生李斯特菌存在较高致病风险。采用ERIC-PCR分型方法，将86株菌分成10个类群，对比ERIC-PCR的指纹图谱与血清分型结果发现，两者呈现较高的相关性。ERIC-PCR不仅能区分单核细胞增生李斯特菌的不同血清型，还能进一步区分同一血清型中的不同亚型菌株。这些分型结果能为该菌的流行病学调查提供数据支持。
　　对所得分离株的菌膜形成能力及其在菌膜状态下对消毒剂的抗性进行了研究。通过96孔板结晶紫染色法，测定分离株的菌膜形成能力，不同菌株之间菌膜形成量存在差异（0.37~1.62），发现1/2b血清型菌株菌膜形成能力较强，冷冻加工能显著影响菌膜形成能力。比较两种消毒剂对菌膜的杀灭效果，H2O2消毒剂对菌膜的最低抑制浓度为7500~17500 ppm，ClO2消毒剂对菌膜的最低抑制浓度为10~30 ppm，前者在国标推荐剂量下无法彻底杀灭菌膜中的单核细胞增生李斯特菌，且随菌膜形成量的提高，灭菌效果下降；后者表现出较好的灭菌效果，且灭菌能力不受菌膜形成量的影响。
　　综上所述，本研究对上海市食品中单核细胞增生李斯特菌的分布状况做了初步描述，并从血清分型及分子分型两个角度分析了单核细胞增生李斯特菌的污染特征。随后，测定了分离株的菌膜形成能力及其在菌膜状态下对消毒剂的抗性，以上结果为单核细胞增生李斯特菌的防控提供了参考依据。

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作者
王文凯;
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作者单位

上海交通大学;

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授予单位上海交通大学;
学科食品工程
授予学位硕士
导师姓名史贤明,陈万义;
年度 2015
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类食品微生物学;
关键词
单核细胞增生李斯特菌; 污染特征; 菌膜; 形成能力;

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