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真皮及脂肪创伤与疤痕形成的关系及两种组织纤维化差异性的研究

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第一部分 真皮及脂肪组织创伤与疤痕形成的关系及两种组织纤维化差异性研究

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

第二部分 真皮及脂肪组织纤维化功能差异性的细胞学机制研究

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

总体结论

参考文献

致谢

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摘要

一、研究背景
　　 深度皮肤创伤常形成增生性疤痕。而增生性疤痕多见于皮肤深层存在“脂肪穹窿”的部位,由此认为脂肪穹窿结构破坏与疤痕形成密切相关。脂肪穹窿破坏包含两个要素:真皮全层丢失和脂肪受损。那么,这两者在疤痕形成中的作用如何?此外,皮肤是由表皮、真皮及皮下脂肪层组成。而不同组织(如表皮、真皮)的愈合规律均存在着差异。那么同一胚层来源的真皮及脂肪组织,其创伤后纤维化愈合进程中,又有哪些不同?通过对两种组织纤维化愈合的差异性研究,可助于拓宽创面修复的理论范畴及解释相关的创伤修复学事件。
　　 二、研究目的
　　 通过真皮和脂肪组织切割伤模型的建立,分别研究真皮及脂肪组织创伤对疤痕形成的影响,明确单一真皮及脂肪组织创伤与疤痕形成的关系及其内在机制。并通过对真皮及脂肪组织愈合中纤维化差异性研究,以认知深度皮肤创伤时累及不同组织(真皮、脂肪)其创伤愈合特征性。最终明确真皮缺损是脂肪穹窿受损易长疤的主要因为而非脂肪受损,来丰富和完善疤痕形成的“模板缺损学说”和“脂肪穹窿”受损理论。
　　 三、研究内容
　　 (一)、通过建立真皮和脂肪组织切割伤模型,观察并比较两组创伤后大体及组织学愈合情况。明确真皮及脂肪组织创伤这两者在疤痕形成中所起的作用及其内在机制。
　　 (二)、通过对以上两组切缘处,组织学愈合情况,修复细胞增殖凋亡、分化及合成细胞外基质等方面的比较,了解两种不同组织创伤后,其纤维化愈合方面的差异性及与其相关的细胞学事件,明确两种不同组织的纤维化愈合特征。并检测两组皮下脂肪组织中与纤维化相关的脂源性因子(Leptin、Adiponectin等)的表达情况。初步明确脂肪组织创伤后与纤维化相关的脂源性因子的变化规律。
　　 (三)、通过对真皮及脂肪组织切割伤切缘处修复细胞的鉴定,明确两种组织中的成纤维细胞在上述纤维化差异性现象中所起的作用。
　　 (四)、通过体外实验,对比真皮及脂肪组织来源的成纤维细胞形态及功能(合成、分泌细胞外基质及表达促纤维化因子如TGF-β1、IGF-1等)方面的差异,明确两种组织成纤维细胞是否存在异质性；通过脂肪组织中成熟脂肪细胞及基质部分与真皮成纤维细胞Transwell共培养研究,观察真皮成纤维细胞增殖及分泌Ⅰ、Ⅲ型胶原功能是否受到脂肪组织组织成分的调控和影响,明确脂肪组织微环境在两种组织纤维化差异性中所起的作用。由此初步阐明两种组织创伤纤维化差异性的细胞学机制。
　　 四、研究结果
　　 (一)、明显的疤痕形成只出现在真皮组织切割伤组的皮瓣中央,脂肪组织切割伤组皮瓣中央与周围未创伤皮肤组织外观上无明显差异。
　　 (二)、切缘处,真皮组织创伤导致过多的细胞外基质沉积；且与脂肪组织创伤相比,其胶原沉积的数量多且重塑进程慢；修复细胞增殖率高、凋亡率低。此外,脂肪组织创伤后,与纤维化相关的脂源性因子瘦素(Leptin)、脂联素(Adiponectin)的表达量较未创伤脂肪组织有降低的趋势。
　　 (三)、两种组织创伤后,其修复细胞均以肌成纤维细胞为主。
　　 (四)、真皮及脂肪组织来源的成纤维细胞形态不同,合成Ⅰ、Ⅲ型胶原功能各异；Transwell共培养研究中发现,成熟脂肪细胞对真皮成纤维细胞具有促进凋亡或坏死的作用,而脂肪组织中血管基质成分对真皮成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原功能具有促进作用。

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