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肾移植患者尿液Smad2,4,7蛋白检测分析早期发现慢性移植肾肾病

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引言

1研究对象与方法

1.1研究对象

1.2实验设备

1.2.1主要仪器

1.2.2主要试剂

1.3实验方法及过程

1.3.1 Elisa酶联免疫技术1.3.1.1反透析法浓缩样品

1.3.2 Real-Time PCR 1.3.2.1引物设计

1.4统计学分析方法

2结果

2.1研究对象临床资料及Smad蛋白结果分析

2.2研究者尿液Smad mRNA测定分析

2.2.1 Smad的mRNA相对表达量(smad/Actin)

2.2.2溶液曲线和扩增曲线

3讨论

4结论

5本研究创新性的自我评价

参考文献

附录A 缩略词

附录B TGF-β/smad信号传导通路与慢性移植肾肾病

在 学 研 究 成 果

致谢

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摘要

目的:探讨肾移植后患者尿中 smad2,4,7蛋白表达与慢性移植肾肾病(CAN)的关系,以期将检测尿液中 Smads蛋白表达作为一个无创检测指标用于临床。
  方法:实验分为2组,CAN组:肾移植术后发生CAN的患者30例;对照组:肾移植术后未发生 CAN患者30例,留取各组研究对象的早晨中段尿液。用酶联免疫技术(Elisa)检测 CAN组和对照组患者尿液中的Smad2、Smad4、Smad7的蛋白表达,用Real-Time PCR检测CAN组和对照组患者尿液中的Smad2、Smad4、Smad7的mRNA表达。
  结果:经Elisa检测,CAN组患者尿液样本中Smad2、 Smad4、Smad7与非CAN组患者水平的表达存在差异(p<0.05)。RT-PCR结果显示,CAN组患者尿液样本中Smad2、Smad4的mRNA表达均明显高于非CAN组患者,而非CAN组患者尿液样本中Smad7的mRNA表达量显著高于CAN组患者。(p<0.05,具有统计学意义)。
  结论:通过我们的研究发现,CAN患者尿液中Smad2、Smad4的表达及含量均显著高于非CAN患者组,而 Smad7的表达及含量则显著低于另一组,因此我们认为利用尿液 Smad2、Smad4及 Smad7联合诊断 CAN具有一定的临床意义。这为我们找到了一个可以利用并且比较便捷的无创诊断慢性移植肾肾病的方法,从而为临床医生在临床诊断中提供了非常具有价值的参考资料,也为门诊动态观察和随访肾移植受者提供了一个可靠的生物学指标。

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