三种多功能纳米探针的构建及对两种食品致病因子快速检测方法的改进研究

摘要

第一章绪论

1．1食品致病因子的检测现状

1．2．2氯霉素

1．3食品致病菌和抗生素残留的检测方法

1．3．1常规检测方法

1．3．2免疫学检测方法

1．3．3核酸分子检测技术

1．3．4检测方法的应用现状

1．4纳米标记探针在快速检测领域的应用

1．4．1纳米磁珠

1．4．2石墨烯

1．4．3双金属纳米粒子

1．5便携式葡萄糖传感器对非葡萄糖目标物的检测研究

1．6课题的研究意义、目的和创新性

1．6．1研究意义和目的

1．6．2创新性

第二章基于葡萄糖传感器和双功能化纳米探针的定量免疫层析法快速检测大肠埃希氏菌O157∶H7

2．1材料与方法

2．1．1菌种

2．1．2试剂和仪器

2．1．3功能化磁珠的制备

2．1．4免疫层析试纸条的准备

2．1．5菌株和培养条件

2．1．7双功能化纳米探针定量免疫层析方法的建立

2．1．8实际样品预培养时间的确定

2．2结果和讨论

2．2．1磁珠的表征

2．2．2实验条件的优化

2．2．3定量免疫层析方法检测E．coil O157∶H7的性能评价

2．2．4特异性和抗干扰评价

2．2．5加标食品样品检测评价

2．2．6实际样品的双盲检测

2．3结论

第三章基于拟酶纳米探针和信号双重放大系统的免疫比色法快速检测大肠埃希氏菌O157∶H7

3．1材料与方法

3．1．1实验材料

3．1．2捕获探针的制备

3．1．3 rGO-NR-Au@Pt纳米复合材料的制备

3．1．5大肠埃希氏菌O157∶H7的免疫比色分析流程

3．1．6大肠埃希氏菌O157∶H7灭活菌液的制备

3．1．7预培养时间的确定

3．1．8材料的表征

3．2结果与讨论

3．2．1磁珠和rGO-NR-Au@Pt的表征

3．2．2捕获探针的制备条件优化

3．2．3优化Au@Pt的制备和封闭蛋白的选择

3．2．4免疫比色分析法的分析性能

3．2．5免疫比色分析的特异性

3．2．6定性分析的预培养时间

3．2．7实际样品的双盲试验

3．3结论

第四章基于背景荧光猝灭探针免疫层析技术定量检测牛奶中的氯霉素

4．1材料与方法

4．1．1试剂和仪器

4．1．2溶液配制

4．1．3胶体金的制备

4．1．4胶体金标记抗体最佳pH值和最佳蛋白浓度的确定

4．1．5猝灭探针的制备流程

4．1．6试纸条的前处理、组装及结构优化

4．1．7 T线抗原包被量的确定

4．1．8本方法检测标准流程的确定

4．1．9标准曲线的建立

4．1．10特异性的测定

4．1．12烤评试验确定稳定性

4．2结果与讨论

4．2．1胶体金标记抗体的最佳pH值和最佳蛋白浓度

4．2．2试纸条结构

4．2．3 T线抗原包被量

4．2．4标准曲线及灵敏度

5．2．5特异性验证

4．2．6加标回收率的测定

4．2．7稳定性的测定

4．3结论

第五章总结与展望

参考文献

附录

感谢基金支持

致谢

攻读硕士学位期间主要研究成果

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