EYES ABSENT和SINE OCULIS在黑腹果蝇眼睛发育过程中的功能研究

声明

摘要

符号说明

第一章 研究背景与文献综述

1 黑腹果蝇眼睛的发育

1．1 经典模式生物——黑腹果蝇

1．2 果蝇眼睛作为发育模式系统

1．3 果蝇眼睛发育过程的概述

2 眼睛决定基因网络(RDGN)和异位眼诱导

2．1 眼睛决定基因网络(RDGN)

2．2 RDGN成员参与易位眼的诱导

2．3 易位眼诱导系统的应用

2．4 易位眼诱导系统的缺陷

3 Eyes absent(Eya)和Sine Oculis(So)

3．1 Eyes absent的结构、功能以及和RDGN成员间的蛋白互作

3．2 Sine Oculis的结构、功能以及和RDGN成员间的蛋白互作

3．3 Eyes absent和Sine Oculis在果蝇发育过程中的作用

3．4 Eyes absent和Sine Oculia在果蝇眼睛发育过程中的作用

3．5 哺乳动物EYA1-4与发育和疾病的关系

3．6 哺乳动物SIX1-6与发育和疾病的关系

4 本论文的课题确立与研究进展

第二章 Eya酪氨酸磷酸酶活性对于果蝇发育和存活的影响

1 前言

2 实验材料与仪器设备

2．1 果蝇品系

2．2 细菌菌株及质粒

2．3 主要试剂

2．4 仪器设备

3 实验方法

3．1 质粒构建

3．2 果蝇实验

3．3 成虫眼睛内部结构的组化检测

3．4 幼虫眼成虫盘免疫组化染色

3．5 幼虫眼—脑复合物免疫组化染色

3．6 视网膜电图(Electroretinograms，ERG)

4 实验结果和说明

4．1 eya基因组拯救质粒

4．2 eya*GR质粒能够完全拯救eya突变背景下果蝇的生存力和眼睛发育

4．3 eya*GR质粒能够完全拯救果蝇幼虫眼成虫盘的发育

4．4 eya*GR无效突变拯救型果蝇具有正常的眼功能

4．5 eya*GR无效突变拯救型果蝇的感光细胞轴突投射表现正常

5 小结和讨论

第三章 Eya转录激活结构域对于果蝇发育和存活的影响

1 前言

2 实验材料与仪器设备

2．1 果蝇品系

2．2 细菌菌株及质粒

2．3 主要试剂

2．4 仪器设备

3 实验方法

3．1 质粒构建

3．2 果蝇实验

3．3 眼成虫盘RNA的提取

3．4 RNA中残余DNA的去除

3．5 RT-PCR

3．6 眼成虫盘蛋白的提取

3．7 Western Blot

3．8 幼虫眼成虫盘免疫组化染色

4 实验结果和说明

4．1 eya△PSTGR质粒的构建和验证

4．2 eya△PSTGR质粒无法拯救eya突变背景下果蝇的生存力和眼睛发育

4．3 eya△PST在转基因果蝇中有表达(转录水平)

4．4 Eya△PST在转基因果蝇中有表达(蛋白水平)

4．5 eya△PSTGR质粒的嵌合克隆分析

4．6 PST结构域缺失导致Dac表达降低

5 小结和讨论

第四章 Sine oculis参与调节与果蝇眼睛发育相关的多个基因

1 前言

2 实验材料和方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 实验结果和说明

3．1 So ChIP-seq结果

3．2 So ChIP-seq峰的富集

3．3 基因本体论分析

3．4 So全新靶基因的筛选

4 小结和讨论

展望和总结

参考文献

致谢

博士期间发表论文