三种病毒性出血热荧光与可视化基因芯片检测方法的建立

声明

摘要

英文缩写词表

第一章 前言

1．1 病毒性出血热的概况

1．2 克里米亚-刚果出血的概况

1．2．1 CCHFV的基因组结构及功能

1．2．2 CCHFV的实验室检测

1．3 裂谷热的概况

1．3．1 RVFV的基因组结构及功能

1．3．2 RVFV的实验室检测

1．4 拉沙热的概况

1．4．1 LAV的基因组结构及功能

1．4．2 LAV的实验室检测

1．5 基因芯片技术的概况

1．6 基因芯片技术的应用

1．7 纳米金颗粒的概述

1．8 纳米金颗粒在基因芯片技术中的应用

1．9 研究的目的与意义

第二章 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 质粒与病毒

2．1．2 主要试剂

2．1．3 耗材与设备

2．2 方法

2．2．1 实验技术路线

2．2．2 三种病毒基因序列的比对及人工合成

2．2．3 探针与引物的设计

2．2．4 主要溶液的配制

2．2．5 检测样本的提取

2．2．6 建立多重PCR体系

2．2．7 荧光基因芯片的制备

2．2．8 杂交条件的优化

2．2．9 可视化基因芯片的制备

2．2．10 特异性试验

2．2．11 敏感性试验

2．2．12 重复性试验

第三章 结果与分析

3．1 CCHFV、RVFV、LAV的目的基因合成结果

3．2 引物设计结果

3．3 探针设计结果

3．4 探针特异性评价

3．5 病毒cDNA的PCR鉴定

3．6 杂交条件的优化结果

3．6．1 杂交时间的优化结果

3．6．2 杂交温度的优化结果

3．7 荧光基因芯片杂交结果

3．8 可视化基因芯片杂交结果

3．9 两种基因芯片检测方法特异性验证结果

3．10 两种基因芯片检测方法灵敏性检测结果

3．11 两种基因芯片检测方法重复性验证结果

第四章 讨论

4．1 两种基因芯片的比较分析

4．2 探针的设计影响检测的特异性和杂交效率

4．3 微阵列的制备

4．4 杂交试验的优化

4．5 标记系统影响杂交效率

4．6 检测结果的灵敏性分析

第五章 结论

参考文献

致谢

研究生期间发表论文情况