SH-SY5Y细胞中α7尼古丁受体拮抗或基因沉默对Tau蛋白S404和S214位点磷酸化水平的影响及其与p38 MAPK信号通路的关系

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目的：研究α7尼古丁受体(nAChR）拮抗或基因沉默对SH-SY5Y细胞Tau蛋白S404和S214位点磷酸化水平的影响及其与p38 MAPK通路的关系，探讨α7 nAChR调节Tau蛋白位点磷酸化的相关机制。　　方法：用α7 nAChR拮抗剂MLA、p38 MAPK通路阻滞剂SB203580及通路激动剂Anisomycin分别或联合处理SH-SY5Y细胞。用Real-time PCR法和Western blotting法分别测定沉默细胞中α7 nAChR在mRNA和蛋白质表达水平的变化；Western blotting方法测定细胞 Tau蛋白、p-Tau(S404)、p-Tau(S214)、p38 MAPK及 p-p38 MAPK（Thr180/Tyr182）蛋白水平。　　结果：α7 nAChR沉默组与空质粒组相比，α7 nAChR mRNA和蛋白质水平分别降低了91%(P<0.01)和80%(P<0.01)；p-Tau(S404)蛋白水平升高了71%(P<0.01)，p-Tau(S214)蛋白水平升高了73%(P<0.01)，p-p38蛋白水平升高了65%(P<0.01)。此外，Anisomycin与MLA、SB203580与MLA、单独MLA处理组共同检测Tau蛋白S404和S214位点磷酸化水平及通路蛋白表达情况，结果显示，MLA处理组和Anisomycin与MLA共同处理组均引起p-Tau(S404)、p-Tau(S214)及p-p38 MAPK蛋白水平明显升高(P<0.01)，SB203580与MLA共同处理组引起p-Tau(S404)、p-Tau(S214)和p-p38 MAPK蛋白水平显著降低(P<0.01)。　　结论：α7 nAChR基因沉默或受体拮抗可导致Tau蛋白S404和S214位点磷酸化水平升高并激活p38 MAPK信号通路；抑制p38 MAPK信号转导通路可使MLA诱导的Tau蛋白S404和S214位点磷酸化水平显著降低。

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作者
周飞;
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作者单位

贵州医科大学;

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授予单位贵州医科大学;
学科生物化学与分子生物学
授予学位硕士
导师姓名齐晓岚;
年度 2017
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类
关键词
阿尔茨海默病,SH-SY5Y细胞,α7尼古丁受体拮抗,基因沉默,Tau蛋白,磷酸化,p38 MAPK信号通路;

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