大肠杆菌mRNA膜周定位对其降解速度的影响

第一章 大肠杆菌mRNA降解的研究进展

1.1 mRNA降解概述

1.2 影响大肠杆菌mRNA降解速度的因素

1.3 核糖核酸酶E概述

1.4 RNase E中膜定位功能片段的研究

第二章 PUF蛋白的研究进展

2.1 PUF蛋白概述

2.2 PUF蛋白的结构

2.3 PUF蛋白的功能

第三章 研究目的及意义

3.1 本课题的研究目的及意义

第四章 PUF蛋白的大肠杆菌内膜定位

4.1 前言

4.2 实验材料与仪器

4.2.1 菌株与载体

4.2.2 化学试剂及配制

4.2.3 仪器设备

4.3 实验方法

4.3.1 感受态制备

4.3.2 质粒提取

4.3.3 PCR扩增

4.3.4 TA克隆与转化

4.3.5 酶切与回收

4.3.6 T4连接与转化

4.3.7 蛋白表达及电泳检测

4.3.8 蛋白位置观察

4.4 实验结果

4.4.1 目的基因获取结果

4.4.2 载体构建结果

4.4.3 蛋白表达及位置观察结果

4.5 讨论

第五章 大肠杆菌内源mRNA的筛选及对应PUF蛋白的设计合成

5.1 前言

5.2 实验材料与仪器

5.2.1 菌株与载体

5.2.2 化学试剂及配制

5.2.3 仪器设备

5.3 实验方法

5.3.1 目标mRNA筛选

5.3.2 PUF蛋白的设计

5.3.3 酶切与回收

5.3.4 T4连接与转化

5.3.5 蛋白表达与纯化

5.3.6 蛋白标准曲线制作及浓度测定