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棘茎楤木快速繁殖技术研究

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1 绪论

1.1棘茎楤木简述

1.2国内外楤木属植物的研究进展

1.3植物体细胞胚胎发生

1.4本研究的目的和意义

2 棘茎楤木的扦插繁殖研究

2.1试验地概况

2.2试验材料与方法

2.3结果与分析

2.4结论与讨论

3棘茎楤木的组织培养研究

3.1试验材料

3.2试验方法

3.3结果与分析

3.4小结与讨论

4棘茎楤木体细胞胚发生

4.1试验材料

4.2试验方法与内容

4.3结果与分析

4.4结论与讨论

5 本文主要研究成果、创新点及展望

5.1研究成果

5.2创新点

5.3存在地问题及展望

参考文献

附图

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攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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摘要

棘茎楤木(Aralia echinocaulis)五加科楤木属药用植物。近年来,关于棘茎楤木药理和药效学研究多见报道,而其种群繁殖方面却未见报道,而同属的楤木(A.chinensis)、辽东楤木(A. elata)等的繁殖技术已多有报道。本研究旨在通过探索根段快速繁殖的技术,这将对棘茎楤木的植物资源开发具有重要的实践意义。  研究结果如下:  (1)通过棘茎楤木的扦插试验发现,所设试验范围内,扦插根段的长度、生根调节剂、生根调节浓度、生根调节剂浸泡时间以及插条粗度对棘茎楤木扦插存活率的影响均显著。但是对扦插苗成活后,生长指标的影响不显著。综合分析,根段长度在15cm,ABT生根粉浓度为100 mg·L-1,浸泡根段2h时效果最佳。  (2)棘茎楤木的组织培养:不同外植体,愈伤组织的诱导响应不同。通常无菌材料所需要的细胞分裂素浓度和生长素浓度较低,成年植株所采外植体材料启动所需要时间较长且激素水平较高。无菌叶片在A6(MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1+2,4-D0.1 mg·L-1+AC0.1g·L-1)培养基中,诱导率达到100%。无菌材料茎段和三年生植株所采茎段外植体均在A1(MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+2,4-D0.1 mg·L-1+AC0.1g·L-1)培养基中,诱导率为最高,分别可达到98.33%和96.67%;三年生植株叶片外植体在A4(MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+2,4-D0.5 mg·L-1+AC0.1g·L-1)培养基中诱导率为最高,可达到96.67%。  愈伤组织在增殖分化培养基培养6周与9周的愈伤组织的生长状态有较大差别,愈伤组织的分化率差异显著(p<0.05),C5、C8、C14、C16培养基上胚状体的发生,其中C16多伴随丛生芽的发生。C8培养基再生植株玻璃化,C6畸形苗率高。PVPP的4个水平下,褐化率水平均值相近,差异不显著(p>0.05)。综合分析得出,诱导愈伤组织分化和胚性愈伤组织形成的最佳培养基为C1(MS+6-BA0.1 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+2,4-D0.01 mg·L-1+PVPP0.1g·L-1),其次为C6(MS+6-BA0.2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+2,4-D0.01 mg·L-1+PVPP1g·L-1)、C14(MS+6-BA1 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+2,4-D0.1 mg·L-1+PVPP0.1g·L-1)、C16(MS+6-BA1 mg·L-1+NAA1 mg·L-1+2,4-D0.01 mg·L-1+PVPP0.1g·L-1)。  (3)体胚再生的研究:试验所得最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA0.2mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1。体胚诱导及成熟的最佳培养基为不添加任何植物激素的MS和MS+PEG10mg·L-1培养基。添加PEG10、PEG20都能明显促进棘茎楤木体细胞胚的成熟和萌发,且能降低畸形胚的频率,而当PEG浓度超过50 mg·L-1时,体胚接入3周后出现水渍化现象,降低了体胚的有效萌发数。将白色的子叶胚转入MS基本培养基上培养7d便开始萌发,20d植株高度超过2cm。体胚苗在不添加任何生长调节剂和添加0.3 mg·L-1LNAA的MS培养基持续培养中,均能观察到次生体胚苗和根蘖的发生。

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