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组蛋白赖氨酸甲基转移酶Setd7促进Ngn1基因的表达

         
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摘要

目的 构建小鼠组蛋白赖氨酸甲基转移酶Setd7真核表达载体并初步探讨其对神经细胞分化的影响.方法 采用基因工程技术,克隆小鼠Setd7基因并将其插入真核表达载体pCMV-3tag-6中,之后转染HEK 293T细胞,Western blot验证其表达;利用实时荧光定量PCR技术检测在神经分化模型(全反式维甲酸诱导P19神经分化)中,Setd7对神经分化关键基因Ngn1的调控;利用双荧光素酶报告系统检测Setd7对Ngn1启动子活性的影响;构建小鼠Setd7 siRNA干扰质粒,利用实时荧光定量PCR技术检测其抑制效果以及对 Ngn1 mRNA表达的影响.结果 成功构建了小鼠Setd7基因的真核表达载体,可在HEK 293T细胞中有效表达;Setd7可促进Ngn1 mRNA表达;Setd7能够促进Ngn1启动子活性; 降低Setd7抑制Ngn1 mRNA 表达.结论 组蛋白赖氨酸甲基转移酶Setd7能够促进神经分化关键基因Ngn1的转录.

著录项

  • 来源
    《中国医学科学院学报》 |2009年第6期|692-695|共4页
  • 作者

    戴津泼; 张业; 沈珝琲;

  • 作者单位

    中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

    中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

    中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生物科学的研究方法与技术;
  • 关键词

    Setd7; 神经分化; Ngn1;

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