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应用荧光原位杂交分析移植山羊体内的人源细胞

         

摘要

目的应用荧光原位杂交(fluoreseenee in situ hybridization,FISH)分析人造血干细胞(human hematopoieticstem cell,hHSC)经宫内移植至山羊体内后人源细胞的存在、比例及其动态变化.方法用人特异17号染色体卫星DNA探针对13头移植山羊进行间期FISH(interphase FISH,IFISH)分析,并用人男性特异Y染色体卫星DNA探针对其中2头移植人男性HSC的山羊进行IFISH分析.标本采用外周血细胞滴片、骨髓涂片和肝脏组织印片.结果在13头移植山羊中,11头山羊体内有人源细胞存在,其中2头为人男性细胞,证实这些山羊为人/山羊异种移植嵌合体;人源细胞比例随山羊月龄递减,最长已存活21个月;所检测月龄段的移植山羊外周血、骨髓和肝脏组织中人源细胞比例小于1‰,但其中2头山羊肝脏组织中人源细胞集中一处,局部比例高达20792‰和392.41‰.结论FISH检测出人源细胞能在山羊体内存在并长期存活,表明山羊是经宫内移植hHSC的合适受体;人源细胞在外周血和骨髓中比例低,而在肝脏组织局部比例高,提示山羊肝脏组织局部内环境适于人源细胞存活、增殖和分化.

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