未修饰的纳米金结合等位特异性扩增来检测K-ras基因点突变

周政; 朱德斌; 邢达

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未修饰的纳米金结合等位特异性扩增来检测K-ras基因点突变

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将等位基因特异性扩增的特异性与纳米金特殊的光学性质相结合,发展了一种新的基因点突变检测方法.以肿瘤中常见的K-ras癌基因第12位密码子作为点突变检测对象,采用突变型引物对待测序列进行等位特异性扩增.突变型样品扩增产物中大部分是双链DNA;而野生型样品由于不能被顺利扩增,产物中大部分是单链DNA.以纳米金颗粒作为报告基团,向两种不同基因型扩增产物中依次加入纳米金胶和盐溶液,野生型基因扩增产物中的单链引物被吸附到纳米金颗粒表面,使得纳米金在适宜浓度的盐溶液中不发生聚集;突变型样品扩增产物中的双链DNA由于与纳米金颗粒间存在静电斥力而不能被吸附到纳米金颗粒表面,纳米金在该浓度的盐溶液中发生聚集,导致两种基因型的混合液在吸收光谱和颜色方面均存在显著差异,从而实现了检测基因点突变的目的.该检测方法直观、快速、简便,实验成本低,能够检测到pmol量级的样品,为点突变检测提供了一种实用的新方法.

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来源
《化学学报》 |2006年第12期|1279-1283|共5页
作者
周政; 朱德斌; 邢达;
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作者单位

华南师范大学激光生命科学研究所;

广州;

510631;

华南师范大学激光生命科学研究所;

广州;

510631;

华南师范大学激光生命科学研究所;

广州;

510631;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类化学;
关键词
纳米金; 表面等离子峰; 等位特异性扩增; 点突变;

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