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蛋白hSav1和Mst1之间的相互作用

         

摘要

目的 探讨hSavl(human salvador 1)和Mstl(Mammalian STE20-like 1)存在的相互作用,为进一步研究Mstl的功能及相关机制奠定基础.方法 以Mstl cDNA全长构建诱饵蛋白载体pGBKT7-Mstl,并对其自身转录活性进行鉴定,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝文库,挑选单克隆,从而初步筛选出与Mstl相互作用的蛋白.然后构建初步筛选出的蛋白hSavl的载体pCMV-HA-hSavl,与蛋白Mstl的载体peDNA/4TO-Flag-Mstl共转染HEK293T细胞,利用相应抗体做二者的免疫共沉淀,以验证蛋白hSavl和Mstl之间的相互作用.其次构建pEGFP-hSavl质粒转染HEK293T,利用免疫荧光观察二者在细胞内的定位.结果 以Mstl为诱饵蛋白在人胎肝文库筛选到包括hSavl在内的与之存在相互作用的蛋白.免疫共沉淀结果 显示,hSavl蛋白可以在FLAG抗体的免疫沉淀物中检测出来,同样在hSavl抗体的免疫沉淀物中也能检测到蛋白Mstl.免疫荧光的结果 显示二者荧光在细胞内存在共定位,二者的荧光可充分融合.结论 蛋白hSavl与Mstl在哺乳细胞内存在某种相互作用,为进一步研究Mstl的功能及相关机制提供了线索.

著录项

  • 来源
    《华中科技大学学报(医学版)》 |2008年第6期|761-763,841|共4页
  • 作者单位

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

    华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科,武汉,430030;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R34;
  • 关键词

    hSavl; Mstl; 蛋白相互作用;

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