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胎鼠肺细胞的分离纯化及原代培养

         

摘要

目的建立一套可靠的胎鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究肺发育和早产儿肺部疾病.方法采用胰酶和胶原酶消化19 d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化胎鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)和肺成纤维细胞(LF),并进行原代培养.用细胞角蛋白(cytokeratin)和波形蛋白(vimentin)免疫细胞化学染色和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定.结果该方法所得细胞产量大、纯度高.免疫细胞化学鉴定,AECⅡ细胞cytoker-atin染色阳性,vimentin染色阴性,LF则相反.透射电镜观察AECⅡ,可见细胞内板层小体.结论该方法是一种可靠的胎鼠肺细胞的分离纯化培养技术,可用于体外研究肺发育与早产儿肺部疾病.

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