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姜黄素对大鼠肝星状细胞中TGF-β调节的NADPH氧化酶4的激活及Smad信号通路的影响

         
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摘要

目的：研究姜黄素潜在的抗纤维化作用，以及转化生长因子β( TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞( HSC-T6)激活的机制。方法不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HSC-T6后，用MTT法测定其对HSC-T6增殖作用的影响；用RT-PCR法检测其mRNA水平的表达；用Westem blot法检测表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质主要成分α1I胶原(Col1α1)、NADPH氧化酶4(NOX 4)、 Smad 2、Smad 3及其磷酸化的水平。结果40μmol/L的姜黄素组刺激HSC-T648 h后，其抑制率达到最大，显著低于仅TGF-β1刺激组、5、10及20μmol/L姜黄素组( P<0．05)。姜黄素可显著降低激活型HSC-T6的α-SMA、α1I胶原mRNA与蛋白表达，从而可以降低细胞外基质的沉积；有效降低了NOX 4的蛋白水平，减少了活性氧的水平；还明显降低Smad 2、Smad 3的磷酸化程度，呈浓度依赖性。结论姜黄素在体外能够明显地抑制HSC-T6激活，对肝纤维化的发生发展具有一定抑制作用，其机制可能与抑制TGF-β诱导的NOX4的激活及Smad信号通路有关。%Objective To observe the effects of curcumin on activation and proliferation of hepatic stellate cells (HSCs) and, their expression of NADPH oxidase 4 (NOX 4) and smad signaling factors of rat hepatic stellate cells line in vitro using a rat HSC line. Methods Synchronized HSC-T6 cells were treated with different dose of purified curcumin (0, 5, 10, 20, 40μmol/L). Untreated cells were viewed as controls. MTT technique analysis was used to examine the proliferation of the hepatic stellate cells stimulated by differernt concentration of curcumin;the mR-NA expression ofα-smooth muscle actin (α-SMA) and main constituents in extracellular matrix I procollagen (α1I collagen) were determined by RT-PCR in TGF-β-stimulated HSCs, and the antifibrotic effects on the protein ex-pression of α-SMA, α1I collagen, NADPH oxidase (NOX) protein (NOX 4) and the phosphorylation level of smad 2 and smad 3 was assessd by western blot;beta-actin (β-actin) was detected as the normalization control in the hepatic smllate cells was examined by Western blot analysis. Results The inhibition rate of HSC-T6 cells was the largest with curcumin for 48 h, significantly lower than that of TGF-β-stimulated group, 5 μmol/L, 10 μmol/L and 20 μmol/L group (P<0. 05). Notably, curcumin could obviously reduce the expression ofα-SMA andα1I collagen at both mRNA and protein levels and reduce the deposition of extracellular matrix. Treatment of curcumin markedly blocks up-regulation of NOX4 by TGF-β. It also significantly reduced TGF-β-induced Smad 2/3 phos-phorylation, and this effect observed dose-dependent. Conclusion Curcumin inhibited TGF-β-mediated HSC acti-vation in vitro, which was involved in Smad signaling pathway, and consequently influenced the profibrotic actions of TGF-β on HSC-T6 cells. Our results suggest that curcumin could become potential candidate for the therapeutic applications by inhibiting the TGF-β induced NOX activation and Smad signaling.

著录项

  • 来源
    《安徽医科大学学报》 |2015年第3期|319-323|共5页
  • 作者

    王雅蕊; 李俊; 黄成; 李小枫; 李晓慧; 王欢;

  • 作者单位

    安徽医科大学药学院;

    合肥 230032;

    安徽医科大学肝病研究所;

    合肥 230032;

    安徽创新药物产业共性技术研究所;

    合肥 230032;

    安徽医科大学药学院;

    合肥 230032;

    安徽医科大学肝病研究所;

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    安徽创新药物产业共性技术研究所;

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    安徽医科大学药学院;

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    安徽医科大学肝病研究所;

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    安徽医科大学肝病研究所;

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    安徽创新药物产业共性技术研究所;

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    安徽医科大学肝病研究所;

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    合肥 230032;

    安徽医科大学药学院;

    合肥 230032;

    安徽医科大学肝病研究所;

    合肥 230032;

    安徽创新药物产业共性技术研究所;

    合肥 230032;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 免疫药理学;
  • 关键词

    姜黄素; 大鼠肝星状细胞; 转化生长因子β; NADPH氧化酶4; Smad蛋白;

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