肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的原核表达、纯化及抗肿瘤活性研究

纪文婷; 许严伟; 张霄翔; 崔春萍; 张庆林

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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的原核表达、纯化及抗肿瘤活性研究

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目的研究rhTRAIL114-281在大肠杆菌中的表达及其纯化产物对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法将经过酶切鉴定的原核表达载体pET-23d(+)/TRAIL114-281转化入宿主菌E.coli w3110,优化目标蛋白表达条件,用离子交换色谱法纯化.目标蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,HPLC检测纯化蛋白纯度,最终用MTT法检测其生物学活性.结果 rhTRAIL蛋白最高表达量可占菌体总蛋白的50%以上,可溶性形式存在的目标蛋白约占上清总蛋白的25%,离子交换纯化后,可溶形式rhTRAIL 对人口腔癌细胞KBV200有明显的生长抑制作用.结论 rhTRAIL蛋白可在转化了重组质粒pET-23d(+)/TRAIL114-281的宿主菌E.coli w3110中高效表达,纯化所得的可溶形式rhTRAIL 对肿瘤细胞有明显的生长抑制作用,该工作为进一步研究开发rhTRAIL奠定了一定的基础.

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来源
《安徽医药》 |2008年第4期|297-299|共3页
作者
纪文婷; 许严伟; 张霄翔; 崔春萍; 张庆林;
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作者单位

合肥工业大学化工学院制药工程系,安徽,合肥,230009;

军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850;

合肥工业大学化工学院制药工程系,安徽,合肥,230009;

军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850;

军事医学科学院,放射与辐射医学研究所,北京,100850;

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正文语种 chi
中图分类肿瘤学;
关键词
TRAIL; 发酵; 纯化; 生物活性;

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