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内质网应激和未折叠蛋白反应相关分子对儿童自身免疫性脑炎T淋巴细胞的影响

         

摘要

目的 观察内质网应激(Endoplasmic ReticulumStress,ERS)对自身免疫性脑炎(Autoimmune Encephalitis,AE)病人T淋巴细胞存活和凋亡的影响以及未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response,UPR)信号通路在AE淋巴细胞存活和死亡中的作用.方法 本研究在2017年2月至2019年2月选取石家庄市第一医院儿科AE病人和健康供者外周血样本进行研究,并用不同浓度的毒胡萝卜素(Thapsigargin,TG)(浓度为0、0.5、1、5、10 nM)分别处理AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,然后利用八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK?8)实验方法检测细胞存活能力;用TG(浓度为5 nM)分别处理AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,流式细胞仪检测TG未处理以及TG处理的T淋巴细胞的细胞凋亡情况;TG(浓度为5 nM)刺激AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,蛋白质印迹法(Western blot)检测UPR标志分子免疫球蛋白结合蛋白(BIP)和同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤?2(Bcl?2)、B淋巴细胞瘤?XL(Bcl?XL)和bcl?2相关X蛋白(Bax)表达水平.结果 TG以剂量依赖性抑制AE病人T淋巴细胞的增殖,促进AE病人T淋巴细胞凋亡,并且使AE病人T淋巴细胞的BIP(0.50±0.05)%比(0.23±0.04)%和抗凋亡蛋白Bcl?2(1.41±0.04)%比(0.73±0.07)%、Bcl?XL(1.23±0.06)%比(0.51±0.05)%表达下调,CHOP(0.53±0.06)%比(0.81±0.07)%和促凋亡蛋白Bax(0.51±0.01)%比(1.25±0.05)%的表达水平显著增加.结论 内质网应激抑制AE病人T淋巴细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能通过BIP和CHOP来影响细胞凋亡.

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