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鲤科疱疹病毒2型 Taqman实时荧光PCR方法的建立

         

摘要

Primers and Taqman probe targeting major capsid protein of cyprinid herpesvirus 2(CyHV-2)were designed and a real-time PCR method was established. The lower limit of detection was 83 copies,and standard curve R2>0.998. Comparison experiments showed that the sensitivity of this method was of same level as existing method.Healthy Carassius auratus gibelio,Carassius auratus auratus,Cyprinus Carpio,4 aquatic viruses and 7 aquatic bacteria were included for specificity tests,no cross reaction was observed. Repeatability tests showed that both coefficients of varia-tion of independent result repeated 15 times were smaller than 2%,suggesting that the repeatability of this method was ideal. The established method would be supplementary to the existing CyHV-2 detection methods,and was of important significance for disease control.%本研究针对鲤科疱疹病毒2型(CyHV-2)的主要衣壳蛋白基因,设计了特异性引物和Taqman探针,建立了实时荧光PCR方法。其检测下限为83拷贝,标准曲线R2>0.998,且经比对,灵敏度与现行方法相当。选取了健康异育银鲫、金鱼、鲤鱼以及常见4种水生DNA病毒以及7种水生环境细菌进行特异性实验,结果均无交叉反应。重复性实验显示,2份独立的15次重复结果变异系数均小于2%,说明本方法重复性好。本方法能作为目前CyHV-2疫病检测方法的有效补充,对该病的防控具有重要的意义。

著录项

  • 来源
    《中国动物检疫》 |2015年第10期|80-84|共5页
  • 作者单位

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

    深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;

    广东深圳 518045;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 动物检疫(兽医检疫);
  • 关键词

    CyHV-2; 实时荧光PCR; Taqman; 异育银鲫; 金鱼;

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