猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因原核表达载体的构建及序列分析

张永富; 马国文; 刘月焕; 刘永宏; 李明刚; 张秋雨; 刘锋

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根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,设计合成一对引物,应用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因(N基因).将所扩增片段克隆入原核表达载体pET-32a(+),pET-ORF7重组质粒转化DH5a宿主菌后,经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的ORF7基因序列进行分析.结果表明,ORF7基因的原核表达载体构建成功.ORF7基因序列与美洲型的ORF7基因核苷酸同源性为92.8%～99.7%,与LV株的相应基因核苷酸同源性为65.3%:推导的氨基酸与美洲型相应基因的同源性为92.0%～99.2%,与LV株的同源性为65.3%.系统进化树表明该PRRSV属于美洲型.本研究为N蛋白的进一步研究和制备诊断性抗原奠定了基础.

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来源
《中国动物检疫》 |2008年第12期|25-2730|共4页
作者
张永富; 马国文; 刘月焕; 刘永宏; 李明刚; 张秋雨; 刘锋;
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作者单位

内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古通辽,028000;

北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089;

北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司,北京,100043;

内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古通辽,028000;

北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089;

北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089;

内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;

北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司,北京,100043;

北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司,北京,100043;

北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司,北京,100043;

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正文语种 chi
中图分类 S852.659.6;
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒; ORF7基因; 原核表达载体;

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