非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定

官丽娟; 黄保续; 邵钰; 任伟杰; 宫枫举; 韩同福; 邹艳丽; 孙学强; 吴晓东; 张志

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cqvip:p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。

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来源
《中国动物检疫》 |2019年第12期|63-67|共5页
作者
官丽娟; 黄保续; 邵钰; 任伟杰; 宫枫举; 韩同福; 邹艳丽; 孙学强; 吴晓东; 张志;
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作者单位

青岛立见诊断技术发展中心山东青岛 266114;

中国动物卫生与流行病学中心山东青岛 266032;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜流行病学、防疫;
关键词
非洲猪瘟病毒; 结构蛋白; p54蛋白; 表达;

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