猪圆环病毒3型新疆株Cap蛋白的原核表达及纯化

谷思颖; 屈勇刚; 魏其; 吴圆圆; 于会举; 李岩

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猪圆环病毒3型新疆株Cap蛋白的原核表达及纯化

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本研究旨在通过构建pGEX-4T-1-Cap原核表达载体,制备猪圆环病毒3型(PCV3)重组核衣壳(Cap)蛋白抗原.将密码子优化的PCV3 Cap全基因插入pGEX-4T-1载体,构建重组质粒pGEX-4T-1-Cap,转化大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞中,筛选出最佳诱导条件,通过谷胱甘肽琼脂糖树脂纯化重组Cap蛋白.结果表明,成功构建重组质粒pGEX-4T-1-Cap;在IPTG终浓度为0.1 mmol/L、16℃诱导20 h的条件下,可获得大量可溶性重组Cap蛋白,SDS-PAGE结果表明分子质量在51.6 ku,与预期相符;Western blotting分析表明经纯化的Cap蛋白与鼠抗GST单克隆抗体、PCV3兔源阳性血清呈阳性反应,进一步证实了重组蛋白的表达.本研究表达并纯化了PCV3Cap重组蛋白,为新型基因工程亚单位疫苗的研制和ELISA血清学诊断方法的建立奠定了基础.

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来源
《中国畜牧兽医》 |2020年第8期|2660-2665|共6页
作者
谷思颖; 屈勇刚; 魏其; 吴圆圆; 于会举; 李岩;
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作者单位

石河子大学动物科技学院石河子832003;

石河子大学动物科技学院石河子832003;

石河子大学动物科技学院石河子832003;

石河子大学动物科技学院石河子832003;

石河子大学动物科技学院石河子832003;

新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站乌鲁木齐830063;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病毒病;
关键词
猪圆环病毒3型(PCV3); Cap蛋白; 原核表达; 蛋白纯化;

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