miR-424-5p/Rictor/mTORC信号轴诱导肝癌细胞自噬性死亡的机制

梁辉; 杨金平; 范银白

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miR-424-5p/Rictor/mTORC信号轴诱导肝癌细胞自噬性死亡的机制

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目的研究miR-424-5p/Rictor/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物(mTORC)信号轴诱导肝癌细胞自噬性死亡的机制。方法选取肝癌细胞系Hep-3B,对照组经PBS处理,过表达miR-424-5p组、干扰miR-424-5p表达组、过表达Rictor组、干扰Rictor表达组分别转染miR-424-5p mimics、miR-424-5p inhibitor、Rictor过表达质粒、Rictor siRNA。检测细胞活性、凋亡、周期,观察切片自噬体形,检测细胞Lc3-Ⅱ、Lc3-Ⅰ、Beclin1、P62 mRNA和蛋白,RT-PCR测定miR-424-5p/Rictor/mTORC2/Akt/mTORC1的mRNA表达,Western blot法检测相关蛋白,并验证miR-424-5p与Rictor靶向关系。结果Hep-3B细胞中miR-424-5p低表达,表达量为(0.45±0.05)。转染后过表达miR-424-5p组G0+G1期细胞高于对照组,细胞活性低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰miR-424-5p表达组及过表达Rictor组G0+G1期细胞比例低于过表达miR-424-5p组,细胞活性高于过表达miR-424-5p组、干扰Rictor表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-424-5p组在488、587 nm激发波长下自噬小体、自噬溶酶体均高于对照组。过表达miR-424-5p组Rictor、mTORC2、Akt、mTORC1表达水平低于干扰miR-424-5p表达组及过表达Rictor组,高于干扰Rictor表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-424-5p组Lc3-Ⅱ、Lc3-Ⅰ、Beclin1表达水平低于另外四组,P62表达水平高于其他四组,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-424-5p可直接抑制Rictor表达,Western blot显示miR-424-5p可抑制Hep-3B细胞内Rictor表达。结论miR-424-5p可通过调控Rictor/mTORC2/Akt/mTORC1表达影响自噬,从而抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡。

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来源
《中国当代医药》 |2022年第29期|5-10|共7页
作者
梁辉; 杨金平; 范银白;
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作者单位

南昌大学第二附属医院肝胆胰腺外科;

江西省赣州市立医院麻醉科;

江西省赣州市人民医院体检科;

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正文语种 chi
中图分类肝肿瘤;
关键词
miR-424-5p; RICTOR; 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物; 免疫荧光;

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