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CA4P诱导大肠癌细胞死亡机制研究及相关通路检测

         

摘要

为探究康普瑞汀磷酸二钠(CA4P)诱导大肠癌SW480细胞死亡机制及相关通路的检测,体外培养SW480细胞,分别给予不同浓度的CA4P进行刺激.采用CCK-8法测定不同浓度药物对SW480细胞活性的抑制率.采用流式细胞术(flow cytom-etry,FCM)测定SW480细胞凋亡率.采用显微镜观察药物作用24、48 h后细胞形态.采用Western blotting检测SW480细胞自噬相关蛋白LC3B、Atg7和Beclin-1的表达情况.Path Scan对相关的激活通路进行检测.CCK-8结果显示,药物浓度>50μmol/L时,体外CA4P对大肠癌细胞的抑制率呈递增趋势;FCM检测表明,CA4P作用后,细胞凋亡率无明显变化;显微镜观察在药物作用24 h,48 h后,SW480细胞的形态发生显著改变.Western blotting结果显示,CA4P刺激SW480使得自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1、Atg7表达水平升高,差异具有统计学显著性意义(P<0.05),phospho-p53表达上调.PathScan结果表明,细胞内信号通路Erk1/2、Akt、p53被激活,AM PKα被抑制.CA4P诱导大肠癌细胞死亡可能是通过自噬途径,并且可能与Erk1/2、Akt、p53的上调和AM PKα的下调有关.

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