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酶标板上基于竞争杂交反应的几种miRNA序列的比色检测

         

摘要

多种miRNA序列的同时检测对癌症的预警与早期诊断具有重要的意义.本文基于生物素标记的miRNA和靶点miRNA与酶标板上固定的寡核苷酸探针之间的竞争反应,通过比色法来定量检测三种与胶质瘤相关的miRNA序列,即miR-182、miR-185和miR-381.通过亲和素与生物素之间的特异性相互作用,将亲和素标记的多聚辣根过氧化物酶(SA-poly-HRP)衍生到微孔表面.通过检测HRP催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺和H2O2的显色反应来对三种靶点miRNA序列进行定量.方法最低检测浓度为10 fmol/L,有望用于临床上miRNA的定量分析.碱基错配的结果表明该方法具有较好的选择性.

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