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小白菊内酯干预骨髓基质细胞对Jurkat细胞黏附作用的影响及其机制研究

摘要

目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓基质细胞(BMSCs)对Jurkat细胞的黏附作用及小白菊内酯(PTL)对此作用的干预机制.方法 采集2013年10月-2014年3月于桂林医学院附属医院经FAB分型及MICM分型确诊为ALL并经治疗后缓解的6例患者髂后上棘骨髓液,体外分离培养BMSCs.Jurkat细胞复苏后传代培养,取生长状态良好的细胞用于实验,建立BMSCs与Jurkat细胞共培养模型.设置Jurkat细胞组、BMSCs组、BMSCs+ Jurkat细胞组、BMSCs+ Jurkat细胞+PTL4 μmoL/L组、BMSCs+ Jurkat细胞+PTL 8 μmol/L组、BMSCs+ Jurkat细胞+ PTL 12 μmol/L组、BMSCs+ Jurkat细胞+PTL 16 μmol/L组.黏附实验检测共培养24 h和48 h后各组黏附率,ELISA测定各组可溶性血管细胞黏附分子-1 (sVCAM-1)表达水平,RT-PCR法检测BMSCs VCAM-1 mRNA的相对表达量.结果 各组培养24h和48 h后,黏附率与PTL浓度呈负相关(r=-0.95、-0.91,P<0.05).各组sVCAM-1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),BMSCs+ Jurkat细胞组、BMSCs+ Jurkat细胞+PTL 4 μmol/L组、BMSCs+Jurkat细胞+ PTL 8 μmol/L组和BMSCs+Jurkat细胞+PTL 12 μmol/L组sVCAM-1表达水平高于BMSCs组(P<0.05),各加入PTL组sVCAM-1表达水平低于BMSCs+Jurkat细胞组(P<0.05),各加入PTL组sVCAM-1表达水平与PTL浓度呈负相关(r=-0.994,P=0.001).各组BMSCs VCAM-1 mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),BMSCs组与BMSCs+ Jurkat细胞+PTL 16 μmol/L组BMSCs VCAM-1 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).各加入PTL组BMSCs VCAM-1 mRNA表达水平与PTL浓度呈负相关(r=-0.994,P=0.001).结论 PTL可以通过降低VCAM-1的表达抑制BMSCs对Jurkat细胞的黏附,减弱骨髓微环境对白血病细胞的保护作用.

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