Jurkat细胞

摘要： 目的观察姜黄素对Jurkat细胞的作用,研究内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用。方法在体外培养体系中,通过甲基噻唑蓝(MTT)比色法分析姜黄素对Jurkat细胞存活和增殖的作用,流式细胞学分析姜黄素对Jurkat细胞凋亡的作用,Western印迹检测Jurkat细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3和内质网应激凋亡信号葡萄糖调节蛋白78、C/EBP同源蛋白和Caspase4的表达。结果姜黄素抑制Jurkat细胞存活,促进Jurkat细胞凋亡。增加姜黄素浓度,Jurkat细胞凋亡率与活化Caspase 3表达递增。20.0μmol/L姜黄素作用时,Jurkat细胞的葡萄糖调节蛋白78、C/EBP同源蛋白和Caspase4同步增加。结论姜黄素激活内质网应激,通过C/EBP同源蛋白介导的内质网应激相关凋亡途径促进Jurkat细胞凋亡。

摘要： 目的探讨微小RNA-150(miR-150)靶向c-Myb表达对人T淋巴细胞白血病(T-LL)Jurkat细胞增殖的影响。方法体外培养人Jurkat细胞,分为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染negative control-miR-150)和miR-150过表达组(转染hsamiR-150 mimic)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Jurkat细胞中miR-150及c-Myb表达;人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测Jurkat细胞增殖;流式细胞仪检测各组Jurkat细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-150和c-Myb的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Jurkat细胞中c-Myb、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果空白对照组与阴性对照组Jurkat细胞中miR-150表达水平、c-Myb mRNA及蛋白表达水平、OD值、细胞凋亡率、及PCNA、Bax蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,miR-150过表达组Jurkat细胞中miR-150表达水平[(1.42±0.14)比(1.03±0.09)]、凋亡率[(20.79±1.15)%比(8.76±0.74)%]、Bax蛋白表达水平[(0.65±0.18)比(0.42±0.13)]显著升高(P<0.05),c-Myb mRNA[(0.66±0.14)比(0.98±0.09)]及蛋白表达水平[(0.37±0.06)比(0.64±0.12)]、OD值[(0.25±0.06)比(0.46±0.09)]、PCNA蛋白表达水平[(0.33±0.07)比(0.56±0.11)]显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,c-Myb是miR-150的靶基因。结论miR-150靶向c-Myb表达抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡。

摘要： 为探讨伏立诺他联合NVP-BEZ235诱导人外周血白血病T细胞(Jurkat细胞)凋亡及机制,培养Jurkat细胞,用伏立诺他或(和)NVP-BEZ235处理,采用流式细胞术检测Jurkat细胞的凋亡情况,Western blot检测FOXO3a磷酸化,免疫荧光检测FOXO3a的核转位核转位。采用si RNA干扰Bim1,观察对Jurkat细胞增殖的影响。结果表明,伏立诺他协同NVP-BEZ235能够促进Jurkat细胞凋亡,降低FOXO3a的磷酸化并诱导其发生核转位,且能诱导Bim1表达,沉默Bim1能逆转伏立诺他和NVP-BEZ235对Jurkat细胞生长的抑制效应。

摘要： 目的 研究螺旋藻多糖(SPP)对人急性T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat的杀伤作用.方法 取对数生长期Jurkat细胞,分为对照组和1 g/L、2 g/L、5 g/L SPP组.采用MTT法检测SPP对Jurkat细胞增殖的影响,Western blot法检测凋亡蛋白caspase-3、细胞膜表面受体CD45、CD71以及细胞内部信号分子p-ERK、p-JNK、t-ERK和t-JNK蛋白表达水平.结果 1 g/L、2 g/L和5 g/L SPP组细胞增殖抑制率依次升高,分别为53.286％±3.112％、80.075％±4.240％和86.430％±4.614％.2 g/L、5 g/L SPP组cleaved caspase-3蛋白表达水平高于对照组,5 g/L SPP组高于1 g/L SPP组(P<0.05).1 g/L、2 g/L SPP组CD45蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),CD71蛋白表达水平与对照组差异无统计学意义;5 g/L SPP组CD45蛋白表达水平均高于对照组、1 g/L和2 g/L SPP组;CD71蛋白表达水平低于对照组(P<0.05),与1 g/L和2 g/L SPP组差异无统计学意义.对照组、1 g/L SPP组、2 g/L SPP组和5 g/L SPP组p-ERK蛋白表达水平依次升高,组间多重比较差异均有统计学意义;各组间t-ERK、p-JNK和t-JNK蛋白表达水平差异均无统计学意义.结论 SPP对Jurkat细胞具有杀伤作用,其机制可能是SPP通过影响细胞膜表面受体CD45和CD71的表达,将凋亡信号传递到细胞内部,通过活化ERK,最终活化caspase-3,诱导细胞凋亡.

摘要： 目的:研究hes家族bHLH转录因子4(HES4)与急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞系Jurkat对化疗药物阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性作用.方法:构建Lenti-pCDH-HES4-puro质粒,包装慢病毒感染Jurkat细胞,感染空载体Lenti-pCDH-puro为对照组,puromycin筛选阳性细胞,Realtime-PCR检测转录水平HES4过表达情况,CCK8法检测Jurkat对Ara-C敏感性,Ara-C终浓度为0.1、1、10、100、1000、10000 nmol ·L-1;设计3对针对于HES4的特异sgRNA序列,构建LentiGuide-sgRNAl-puro、LentiGuide-sgRNA2-Puro、LentiGuide-sgRNA3-puro质粒,LentiGuide-puro空载体为对照组,包装慢病毒感染Jurkat细胞,puromycin筛选,提取基因组DNA,PCR扩增sgRNA的靶序列,一代测序检测HES4的敲除效率,CCK8法检测敲除HES4后Jurkat对Ara-C敏感性,Ara-C终浓度为0.1、1、10、100、1000、10000 nmol·L-1.结果:与对照组相比,HES4在Jurkat中过表达(2.37±0.09)倍(P＜ 0.001),在Ara-C为1 nmol·L-1、100 nmol·L-1浓度下,过表达HES4使Jurkat对Ara-C的药物敏感性降低(P值分别小于0.01、0.05);sgRNA1、sgRNA2、sgRNA 3敲除分值分别为83、71、63,其中sgRNA1的敲除效果最佳,在Ara-C为1000 nmol·L-1浓度下,敲除HES4促进Jurkat对Ara-C的敏感性(P＜0.05),3条sgRNAs之间无明显区别(P＞0.05).结论:HES4抑制T-ALL细胞系Jurkat对Ara-C的敏感性,为T-ALL化疗耐受的机制研究提供指导.

摘要： 目的 探讨硼替佐米(BOR)对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat的增殖抑制和促凋亡作用及其相关作用机制.方法 2017年5月至2019年5月,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTr法)检测硼替佐米对Jurkat细胞增殖的影响;流式细胞仪检测硼替佐米对Jurkat细胞细胞凋亡的影响;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测硼替佐米对Jurkat细胞Bax、Bcl-2、Cox-2基因表达水平的影响.结果 5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL浓度BOR作用于Jurkat细胞24h的增殖抑制率分别为(13.23±0.71)％、(39.53±0.95)％、(53.07±1.12)％、(60.43±0.75)％,48 h的增殖抑制率分别为(25.20±0.96)％、(52.80±1.30)％、(60.67±0.64)％、(75.10±1.35)％,72 h的增殖抑制率分别为(38.37±0.93)％、(60.94±0.85)％、(73.83±5.08)％、(88.37±1.55)％,Jurkat细胞的增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而增加,差异均有统计学意义(F=1 602.202、1 085.089、181.034,均P＜0.05).5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL浓度BOR作用于Jurkat细胞24h、48 h、72 h,Jurkat细胞凋亡率随药物浓度的增加、作用时间的延长而增加,差异均有统计学意义(F=1 288.571、223.378、251.175,均P＜0.05).5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL浓度BOR作用于Jurkat细胞24h、48 h、72 h,Jurkat细胞Bax mRNA表达水平随药物浓度的增加、作用时间的延长而增高,差异均有统计学意义(F=258.446、518.929、276.764,均P＜0.05);而Bcl-2 mRNA、Cox-2 mRNA表达水平随药物浓度的增加、作用时间的延长而减低,差异有统计学意义(FBcl-2mRNA=236.848、264.849、343.968,Fcox-2mRNA =679.404、1 288.681、1 541.850,均P＜0.05).结论 BOR对Jurkat细胞有抑制增殖、诱导凋亡的作用.BOR可使Jurkat细胞BaxmRNA表达水平上调、Bcl-2和Cox-2mRNA表达水平下调.BOR上调Bax表达、下调Bcl-2和Cox-2表达是其促凋亡的分子机制之一.

摘要： 目的 分析硼替佐米联合维生素C(VitC)对淋巴瘤细胞株Jurkat凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 收集淋巴瘤细胞株Jurkat细胞并分成30 nmol/L硼替佐米组、100 μg/ml VitC组及联合组(30 nmol/L硼替佐米联合100 μg/ml VitC治疗).用流式细胞仪和CCK-8检测Jurkat细胞凋亡率和周期及采用免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax的表达情况.结果 VitC组使Jurkat细胞的生长方式从局部聚集变化成平均分布;硼替佐米组于1～2d期间Bcl-2的表达水平较VitC组及联合组降低得更慢,其Bax的表达水平较VitC组及联合组升高得更慢,且VitC组的Bax的表达水平显著高于硼替佐米组.硼替佐米组Jurkat细胞抑制率较VitC组显著升高(P＜0.01),联合组Jurkat细胞抑制率较VitC组和硼替佐米组均显著升高(P＜0.01).相比对照组,硼替佐米组、VitC组及联合组Jurkat细胞凋亡率均显著升高(P＜0.01),且VitC组和联合组Jurkat细胞凋亡率较硼替佐米组均显著升高(P＜0.01).结论 VitC有利于抑制早期淋巴瘤细胞株Jurkat的增殖,同时细胞凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax的表达情况与VitC诱导Jurkat细胞凋亡关系密切.

摘要： 目的:观察青藤碱(SIN)对人急性T淋巴细胞白血病细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制.方法:常规培养H9、Jurkat和MOLT-4细胞,给予不同剂量SIN(0.25、0.5、1、2、4、8 mmol/L)处理48 h后,采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞术检测DNA合成、细胞周期与凋亡,采用Western blot方法检测ERK1/2、p-ERK1/2、Akt、p-Akt、Cyclin B1、CDK1、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平.结果:与对照组相比,随着SIN浓度的增加,Jurkat和MOLT-4细胞活力逐渐降低(P<0.05),IC50分别为1.49 mmol/L和3.08 mmol/L,而H9细胞活力从浓度为4 mmol/L开始才有所降低(P<0.05);不同剂量SIN(0.5、1、2 mmol/L)作用Jurkat细胞48 h后,细胞增殖能力下降(P<0.05),G2/M期细胞比例和细胞凋亡率升高(P<0.05),Bcl-2、Cyclin B1和CDK1蛋白表达水平下调(P<0.05),Bax蛋白表达水平上调(P<0.05),ERK1/2和Akt蛋白的磷酸化水平降低(P<0.05),且呈剂量依赖性.结论:SIN在体外可剂量依赖性地抑制人急性T淋巴细胞白血病细胞增殖并诱导其凋亡,这可能与其下调Bcl-2、Cyclin B1和CDK1蛋白表达水平、上调Bax蛋白表达水平以及抑制ERK1/2和Akt信号通路有关.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：探讨反义survivin异变体对白血病Jurkat细胞凋亡的影响,为临床及科研提供进一步研究方向.方法：构建survivin-2B和survivin-AEx3反义寡核苷酸,利用脂质体法将其转染入Jurkat细胞,实验分为未转染组、无功能siRNA组(阴性对照组)及转染组.采用real-time PCR法检测survivin-2B、survivin-△Ex3 mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定各组细胞的生长抑制率,流式细胞术(FCM)测定各组细胞凋亡率.结果：RT-PCR结果显示转染后转染组survivin-2B和survivin-△Ex3基因表达相对于未转染组及阴性对照组显著下降(P＜0.05).MTT示转染survivin-2B siRNA后细胞生长抑制率为(1.99±0.17)％,未转染组为(12.96±0.31)％,阴性对照组为(9.24±0.28)％(F=15.37,P＜0.05);转染survivin-△Ex3siRNA后细胞生长抑制率为(50.81±3.95)％,而未转染组为(13.62±0.57)％,阴性对照组为(19.58±1.03)％(F=19.75,P＜0.05).FCM示转染survivin-2B siRNA后细胞凋亡减少,凋亡率为(4.13±0.42)％,阴性对照组为(16.55±0.82)％,未转染组为(19.48±1.07)％(F=31.68,P＜0.05).转染survivin-△Ex3 siRNA后细胞凋亡增加,凋亡率为(52.13±3.12)％,阴性对照组为(25.72±1.51)％,未转染组为(18.74±0.91)％(F=25.39,P＜0.05).结论：抑制Survivin-2B促进Jurkat细胞生长和抑制其凋亡,抑制survivin-△Ex3抑制Jurkat细胞生长和促进其凋亡,两者作用相反,靶向不同survMn异变体干扰技术有望提高儿童白血病化疗效果.

摘要： 目的：本实验主要研究NCTD作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53基因表达的变化,进而明确去甲斑蝥素抗肿瘤的主要机制,促进去甲斑蝥素（NCTD）有效应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗,为急性淋巴细胞白血病的治疗开辟崭新途径.方法:1、体外培养Jurkat细胞株:应用常规悬浮细胞培养方法进行培养，备10%FBS的RPM11640培养液，将选中细胞置于其中，密切观察其生长情况，3-4日传代一次，使用对数生长期细胞进行试验。2.Jurkat细胞系在NTCD作用下的体外研究:实验分成两组:①对照组，培养液中不添加任何药物。ONCTD组，配制20mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系.3、两组细胞共同培养72h(己经有实验得出20mg/L浓度的NCTD作用于Jurkat细胞系72h时抑制作用最强)4、运用实时荧光定量RTPCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53基因及survivin基因进行定量检测。5、统计分析。结果:应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因，结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株上升3%，相反survivin基因较对照组下降20%，应用统计学方法t检验得出二者均P<0.01，具有统计学意义。结论:1、上调p53基因途径可能是NCTD诱导Jurkat细胞凋亡，抑制白血病进展的机制之一。2、下调survivin基因途径是NCTD抗白血病作用的的基因途径之一。3、综上所述，由于NCTD能够上调抑癌基因，下调癌基因，因此可以说明该药具有抗白血病作用，且survivin基因及p53基因表达变化可提示NCTD治疗效果，为今后该药物应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗提供重要理论依据。

摘要： 目的：本实验主要研究NCTD作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53基因表达的变化,进而明确去甲斑蝥素抗肿瘤的主要机制,促进去甲斑蝥素（NCTD）有效应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗,为急性淋巴细胞白血病的治疗开辟崭新途径.方法:1、体外培养Jurkat细胞株:应用常规悬浮细胞培养方法进行培养，备10%FBS的RPM11640培养液，将选中细胞置于其中，密切观察其生长情况，3-4日传代一次，使用对数生长期细胞进行试验。2.Jurkat细胞系在NTCD作用下的体外研究:实验分成两组:①对照组，培养液中不添加任何药物。ONCTD组，配制20mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系.3、两组细胞共同培养72h(己经有实验得出20mg/L浓度的NCTD作用于Jurkat细胞系72h时抑制作用最强)4、运用实时荧光定量RTPCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53基因及survivin基因进行定量检测。5、统计分析。结果:应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因，结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株上升3%，相反survivin基因较对照组下降20%，应用统计学方法t检验得出二者均P<0.01，具有统计学意义。结论:1、上调p53基因途径可能是NCTD诱导Jurkat细胞凋亡，抑制白血病进展的机制之一。2、下调survivin基因途径是NCTD抗白血病作用的的基因途径之一。3、综上所述，由于NCTD能够上调抑癌基因，下调癌基因，因此可以说明该药具有抗白血病作用，且survivin基因及p53基因表达变化可提示NCTD治疗效果，为今后该药物应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗提供重要理论依据。

摘要： 目的：本实验主要研究NCTD作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53基因表达的变化,进而明确去甲斑蝥素抗肿瘤的主要机制,促进去甲斑蝥素（NCTD）有效应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗,为急性淋巴细胞白血病的治疗开辟崭新途径.方法:1、体外培养Jurkat细胞株:应用常规悬浮细胞培养方法进行培养，备10%FBS的RPM11640培养液，将选中细胞置于其中，密切观察其生长情况，3-4日传代一次，使用对数生长期细胞进行试验。2.Jurkat细胞系在NTCD作用下的体外研究:实验分成两组:①对照组，培养液中不添加任何药物。ONCTD组，配制20mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系.3、两组细胞共同培养72h(己经有实验得出20mg/L浓度的NCTD作用于Jurkat细胞系72h时抑制作用最强)4、运用实时荧光定量RTPCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53基因及survivin基因进行定量检测。5、统计分析。结果:应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因，结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株上升3%，相反survivin基因较对照组下降20%，应用统计学方法t检验得出二者均P<0.01，具有统计学意义。结论:1、上调p53基因途径可能是NCTD诱导Jurkat细胞凋亡，抑制白血病进展的机制之一。2、下调survivin基因途径是NCTD抗白血病作用的的基因途径之一。3、综上所述，由于NCTD能够上调抑癌基因，下调癌基因，因此可以说明该药具有抗白血病作用，且survivin基因及p53基因表达变化可提示NCTD治疗效果，为今后该药物应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗提供重要理论依据。

摘要： 目的：本实验主要研究NCTD作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53基因表达的变化,进而明确去甲斑蝥素抗肿瘤的主要机制,促进去甲斑蝥素（NCTD）有效应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗,为急性淋巴细胞白血病的治疗开辟崭新途径.方法:1、体外培养Jurkat细胞株:应用常规悬浮细胞培养方法进行培养，备10%FBS的RPM11640培养液，将选中细胞置于其中，密切观察其生长情况，3-4日传代一次，使用对数生长期细胞进行试验。2.Jurkat细胞系在NTCD作用下的体外研究:实验分成两组:①对照组，培养液中不添加任何药物。ONCTD组，配制20mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系.3、两组细胞共同培养72h(己经有实验得出20mg/L浓度的NCTD作用于Jurkat细胞系72h时抑制作用最强)4、运用实时荧光定量RTPCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53基因及survivin基因进行定量检测。5、统计分析。结果:应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因，结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株上升3%，相反survivin基因较对照组下降20%，应用统计学方法t检验得出二者均P<0.01，具有统计学意义。结论:1、上调p53基因途径可能是NCTD诱导Jurkat细胞凋亡，抑制白血病进展的机制之一。2、下调survivin基因途径是NCTD抗白血病作用的的基因途径之一。3、综上所述，由于NCTD能够上调抑癌基因，下调癌基因，因此可以说明该药具有抗白血病作用，且survivin基因及p53基因表达变化可提示NCTD治疗效果，为今后该药物应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗提供重要理论依据。

摘要： 本发明涉及一种Jurkat‑KI‑R5及其构建方法和应用，本发明将强有力的增强子/启动子组合(CAG)通过CRISPR/Cas9基因编辑技术同源重组敲入到CD4+Jurkat T细胞的CCR5基因的启动子区，基因修饰的细胞系命名为Jurkat‑KI‑R5细胞。本发明所述Jurkat‑KI‑R5细胞CAG启动子的精确重组到CCR5启动子指定位置，导致CCR5稳定地高表达。和母系Jurkat细胞相反，Jurkat‑KI‑R5细胞极易被HIV‑1感染。所以，Jurkat‑KI‑R5细胞提供了一个艾滋病研究急需的细胞平台。

摘要： 本发明提供了一方面一种Nur77‑GFP Jurkat报告细胞系及其构建方法，对CAR或者TCR的特异性功能评估具有重大意义，另一方面本发明提供了一种特异性靶向Nur77的sgRNA及其靶向序列及donor DNA载体的左右同源臂序列。

摘要： 本发明涉及一种Jurkat-KI-R5及其构建方法和应用，本发明将强有力的增强子/启动子组合(CAG)通过CRISPR/Cas9基因编辑技术同源重组敲入到CD4+Jurkat T细胞的CCR5基因的启动子区，基因修饰的细胞系命名为Jurkat-KI-R5细胞。本发明所述Jurkat-KI-R5细胞CAG启动子的精确重组到CCR5启动子指定位置，导致CCR5稳定地高表达。和母系Jurkat细胞相反，Jurkat-KI-R5细胞极易被HIV-1感染。所以，Jurkat-KI-R5细胞提供了一个艾滋病研究急需的细胞平台。

摘要： 本发明公开一种转染Jurkat细胞的方法，步骤包括：将0.1mg/mL多聚‑D‑赖氨酸加入24孔细胞培养板，4度静置过夜，吸出液体，超净台内开盖吹干，用PBS洗；向上述培养板接种Jurkat细胞，培养箱中培养，次日移除上清，用PBS洗3次，Jurkat细胞转为“贴壁”状态；按照贴壁细胞转染的常规步骤转染pLL3.7质粒，转染24小时后荧光显微镜下观察GFP的表达量，确定转染效率。本发明对Jurkat细胞进行“贴壁”处理后，可加大脂质体复合物与细胞的接触机会，有效提高转染效率(90％以上)。本发明贴壁处理过程不影响细胞活力，可以对Jurkat细胞安全的转染外源质粒。

摘要： 本发明公开了一种红桂木凝集素促进人外周血CD4+T淋巴细胞增殖活化并抑制人急性淋巴细胞白血病Jurkat T细胞增殖和迁移的方法，从红桂木种子分离纯化红桂木凝集素整个过程中在1-5°C条件下进行，通过MTT实验、DNA分析和流式细胞术证实红桂木凝集素能促进外周血T淋巴细胞CD4亚群的增殖和活化，是一种比PHA更高效的CD4+T淋巴细胞丝裂原，为抗病毒感染及开发疫苗增强剂提供了新型有效的途径；通过CCK-8实验、DNA分析、细胞凋亡分析、ELISA实验、迁移实验等证实红桂木凝集素能明显抑制Jurkat T淋巴细胞的增殖和迁移，是一种比PHA更高效的急性淋巴细胞白血病细胞的生长抑制剂，为血液系统恶性肿瘤的治疗提供了新的有效的辅助手段。

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： 提供能保存细胞的组合物。本发明的组合物包含微小气泡。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。

摘要： 提供一种细胞的培养方法，在细胞培养器内向细胞导入因子，并在与上述细胞培养器相同的细胞培养器内培养导入了上述因子的细胞。另外，提供一种单核细胞的回收方法，其包括：对血液进行处理，制作至少部分地除去了红细胞而得到的处理血液；对处理血液进行稀释；使稀释后的处理血液中所含的单核细胞沉降；除去稀释后的处理血液的上清液；以及回收单核细胞。

摘要： 本实用新型提供一种JURKAT细胞株构建用细胞培养箱，具体涉及生物技术领域，包括一侧开口的箱体，所述箱体内设有间隔板，所述间隔板一端与所述箱体的两侧转动连接，所述间隔板另一端两侧设有导向轴，所述箱体的两侧设有导向槽，所述导向槽呈弧形，且所述导向轴嵌入所述导向槽内；所述箱体的开口设有门板。本实用新型可调整培养皿的放置角度，利于培养实验。