多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析

王蕾; 杨宝良; 魏威; 周培; 刘海生; 李润乐; 汤锋

首页> 中文期刊> 《中国高原医学与生物学杂志》 >多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析

多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的构建多房棘球坳抗原亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)原核表达系统,并做纯化及最佳酶活性条件分析,为后续作用机制研究奠定基础。方法利用Optimum^TM Codon软件对LAP编码序列进行优化后合成目的基因,连接入表达载体pCzn1后转化入大肠杆菌BL-21菌株,在发酵过程中加入IPTG诱导目的蛋白表达后,通过Ni柱亲和纯化获得高纯度重组目的蛋白LAP。以亮氨酸对硝基苯胺(Leu-pNA)为底物测定LAP酶活性,观察酶活性的最适pH和温度,以及不同金属离子对其酶活性的影响。结果﹐基因测序和酶切鉴定显示pCzn1-LAP质粒构建成功,通过Ni柱亲和纯化得到一个大小约为57KD的蛋白。当pH为9.0、温度为60℃时LAP酶活性最强;金属离子对LAP酶活性影响的小大顺序为Co^2+>Zn^2+>Ca^2+>Mn^2+>Mg^2+>Ba>K^+。结论本研究成功构建LAP原核表达系统,表达和纯化了LAP蛋白,获得了酶活性最强时的基础条件,为研发抗寄生虫药物及探究LAP在多房棘球坳感染过程的作用机制奠定了基础。

著录项

来源
《中国高原医学与生物学杂志》 |2020年第4期|P.260-265|共6页
作者
王蕾; 杨宝良; 魏威; 周培; 刘海生; 李润乐; 汤锋;
展开▼
作者单位

青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001青海大学研究生院青海西宁810001;

青海省红十字医院青海西宁810001;

青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001青海大学研究生院青海西宁810001;

青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001青海大学研究生院青海西宁810001;

青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001;

青海大学基础医学部青海西宁810001;

青海大学高原医学研究中心青海省高原医学应用基础重点实验室青海西宁810001;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;
关键词
多房棘球坳; LAP; 原核表达; Leu-pNA; 酶活性;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析 [J] . 王蕾 ,杨宝良 ,魏威 . 青海医学院学报 . 2020,第004期
2. 多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶优势抗原表位的鉴定 [J] . 王蕾 ,魏威 ,周培 . 中国人兽共患病学报 . 2021,第004期
3. 血清丙氨酸氨基转移酶、y-谷氨酰氨基转肽酶、亮氨酸氨基肽酶水平联合检测在甲亢合并肝损害患者早期诊断中的应用价值 [J] . 黄朝凤 . 医学检验与临床 . 2021,第001期
4. 血清丙氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰氨基专肽酶、亮氨酸氨基肽酶水平联合检测在甲亢合并肝损害患者早期诊断中的应用价值 [J] . 黄朝凤 . 医学检验与临床 . 2021,第001期
5. 异常妊娠孕妇血清亮氨酸氨基肽酶活性检测的价值 [J] . 汤菲 ,张智慧 ,陈晶 . 检验医学 . 2014,第008期
6. 细粒棘球蚴囊液纯化抗原的氨基酸分析 [C] . 邓永芳 . 中国动物学会第六次寄生虫学学术讨论会 . 1997
7. 多房棘球蚴抗原蛋白Emy162及TSP3的抗原表位的预测及鉴定 [A] . 庞明泉 . 2016

多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅