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异氟醚预处理对谷氨酸诱导大鼠神经元样PC12细胞凋亡的影响

         

摘要

目的探讨异氟醚预处理对谷氨酸诱导大鼠神经元样PC12细胞凋亡的影响。方法神经生长因子孵育5d的神经元样PC12细胞,以5×10~4个/ml密度接种于6 cm培养皿(3 ml/皿)或6孔板(2 ml/孔),采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=18):正常对照组(C组)、谷氨酸组(G组)、谷氨酸+异氟醚组(GI组)和谷氨酸+异氟醚+三磷酸肌醇受体拮抗剂光溜海绵素组(GIX组)。C组不做任何处理;G组、GI组和GIX组均加入500μmol/L谷氨酸,GI组和GIX组通入1.2%异氟醚2 h,停止通入后10 min加入谷氨酸,GIX组通入异氟醚前即刻加入光溜海绵素100 nmol/L。于谷氨酸孵育20 min时,每组取6皿和6孔,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位(MMP),采用显微荧光测量技术检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。结果与C组比较,G组和GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i升高,MMP降低(P<0.01),GI组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与G组比较,GI组和GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i降低,MMP升高(P<0.05或0.01);与GI组比较,GIX组细胞凋亡率和[Ca2+]i升高,MMP降低(p<0.01)。结论异氟醚预处理可抑制大鼠神经元样PC12细胞凋亡,其机制与激活内质网三磷酸肌醇受体,抑制内质网释放Ca2+,提高MMP有关。

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