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cAMP-PKA-CREB信号通路在缺氧预处理减轻异丙酚诱导发育期大鼠中枢神经毒性中的作用

         
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目的评价环磷腺苷-蛋白激酶A-环磷腺苷反应元件结合蛋白（cAMP-PKA-CREB）信号通路在缺氧预处理减轻异丙酚诱导发育期大鼠中枢神经毒性中的作用。方法 SPF级雄性SD大鼠70只,7日龄,体重10～15 g,采用随机数字表法将其分为7组（n=10）:生理盐水组（N组）腹腔注射等容量生理盐水;异丙酚组（P组）腹腔注射异丙酚50 mg/kg,待翻正反射恢复再后追加50 mg/kg;缺氧预处理+异丙酚组（HP组）缺氧预处理（氧浓度8%维持10 min,然后置于空气中10 min,循环5次）结束后2 h时腹腔注射异丙酚（方法同P组）;缺氧预处理+异丙酚+PKA抑制剂H89组（HPH组）侧脑室注射H89 5μmol/5μl,30 min后处理同HP组;异丙酚+PKA激动剂SP-CAMP组（PS组）侧脑室注射SP-CAMP 20 nmol/5μl,30 min后腹腔注射异丙酚（方法同P组）;生理盐水侧脑室注射组（NI组）和5%二甲基亚砜侧脑室注射组（DI组）分别侧脑室注射5μl生理盐水和5%二甲基亚砜。待翻正反射恢复后立即处死,取海马组织,行HE染色,采用免疫组化法测定海马PKAc和磷酸化CREB（p-CREB）阳性细胞数,采用Western blot法测定海马活化caspase-3、Bcl-2、Bax、PKAc、CREB和p-CREB表达水平。结果与N组比较,P组海马活化caspase-3和Bax表达上调,Bcl-2、PKAc和pCREB表达下调,PKAc和p-CREB阳性细胞百分比降低（P＜0. 05）,海马细胞排列紊乱,细胞萎缩;与P组比较,HP组和PS组海马活化caspase-3表达下调,Bcl-2、PKAc和p-CREB表达上调,PKAc和pCREB阳性细胞百分比升高,HP组Bax表达下调（P＜0. 05）,海马细胞排列整齐、胞浆丰富、胞核可见;与HP组比较,HPH组海马活化caspase-3表达上调,Bcl-2、PKAc和p-CREB表达下调,PKAc和pCREB阳性细胞百分比降低（P＜0.05）,细胞排列紊乱、细胞缩小、核固缩。结论缺氧预处理减轻异丙酚诱导发育期大鼠中枢神经毒性的机制可能与激活cAMP-PKA-CREB信号通路有关。

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