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边缘无浆体MSP5基因片段的克隆与原核表达

         

摘要

目的 克隆边缘无浆体MSP5基因,构建重组质粒,并进行表达与鉴定.方法 根据GenBank公布的边缘无浆体MSP 5基因序列(AY714547)设计一对引物,无菌颈静脉采集边缘无浆体阳性的牛血,用PCR方法从4血的DNA模板中扩增MSP 5基因582bp的片断.将该片段克隆到原核表达载体pGEX-KG中,构建原核表达载体KG-MSP5,转化BL21,经IPTG的诱导表达蛋白.利用BugBuster GST Bind Purification Kit将其纯化,经Western blotting进行分析.结果 重组质粒KG-MSP5,转化BL21,在IPTG的诱导下表达大小约46 kPa蛋白.western blotting分析表明其具有很好的免疫原性.结论 本研究为边缘无浆体的血清学诊断试剂盒的研制奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《中国动物传染病学报》 |2007年第4期|11-15|共5页
  • 作者单位

    华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;

    华中农业大学动物医学院,武汉,430070;

    上海出入境检验检疫局,上海,200135;

    上海出入境检验检疫局,上海,200135;

    华中农业大学动物医学院,武汉,430070;

    华中农业大学动物医学院,武汉,430070;

    上海出入境检验检疫局,上海,200135;

    华中农业大学动物医学院,武汉,430070;

    华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;

    华中农业大学动物医学院,武汉,430070;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 立克次氏体;
  • 关键词

    边缘无浆体; MSP5; 原核表达; 纯化;

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