非洲猪瘟病毒H240R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

李佳佳; 东梦珂; 郑南南; 吴宏举; 张昂克; 张改平; 万博; 杜永坤

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非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的急性、高热、严重出血、致死率极高的动物传染病,给我国养殖业造成严重的经济损失.本研究将非洲猪瘟病毒H240R基因克隆至pET-28a(+)载体中,成功构建了pET-28a(+)-H240R原核表达载体,将重组载体转化入BL21感受态细胞,用IPTG诱导表达.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得了H240R重组蛋白,将其纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔,分离血清并分析其反应特异性.ELISA检测结果显示,血清抗体效价达到1∶256 000.Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定结果表明,制备的兔源多克隆抗体能够同时与原核和真核表达的H240R蛋白反应.本研究成功制备针对ASFVH240R蛋白的多克隆抗体,该多克隆抗体具有良好的反应活性及特异性,为建立针对ASFV抗原、抗体的免疫学检测方法提供了新的思路.

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来源
《中国动物传染病学报》 |2021年第3期|101-106|共6页
作者
李佳佳; 东梦珂; 郑南南; 吴宏举; 张昂克; 张改平; 万博; 杜永坤;
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作者单位

河南农业大学国家动物免疫学国际联合研究中心郑州450046;

河南农业大学国家动物免疫学国际联合研究中心郑州450046;

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河南农业大学国家动物免疫学国际联合研究中心郑州450046;

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河南农业大学国家动物免疫学国际联合研究中心郑州450046;

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正文语种 chi
中图分类 S852.651;
关键词
非洲猪瘟病毒; H240R蛋白; 原核表达; 多克隆抗体;

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